他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞的作用及對(duì)黑素細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:
　　 觀察他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞增殖、分泌IL-6和sIL-2R及IL-6mRNA,sIL-2RmRNA表達(dá)的影響及其通過(guò)淋巴細(xì)胞對(duì)黑素細(xì)胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性及VIT-1mRNA表達(dá)的影響,探討其在治療白癜風(fēng)中的作用機(jī)制。
　　 方法:
　　 本實(shí)驗(yàn)選用人Jurkat淋巴瘤細(xì)胞株和小鼠B16黑素瘤細(xì)胞株為研究對(duì)象,采用ELISA法測(cè)定他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞分泌IL-6和sIL-2R的影響,MTT法檢測(cè)他

2、克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞增殖及淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞增殖的影響,NAOH裂解法測(cè)定淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的影響,多巴氧化法測(cè)定淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性的影響,SYBR GREEN實(shí)時(shí)熒光定量PCR法分析他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞IL-6mRNA,sIL-2RmRNA表達(dá)的影響及淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞VIT-1mRNA表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:
　　 101～102nmol/L的他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞增殖無(wú)影響,10

3、3～104nmol/L的他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞增殖有抑制作用。
　　 ELISA結(jié)果顯示:102～104nmol/L的他克莫司均可以降低淋巴細(xì)胞合成IL-6和sIL-2R(P<0.05),其中103 nmol/L和104nmol/L的他克莫司作用顯著(與對(duì)照組比較,P<0.01)。
　　 經(jīng)他克莫司作用后的淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞增殖的影響不明顯。
　　 經(jīng)101～104nmol/L的他克莫司作用后的淋巴細(xì)胞上清液均

4、可促進(jìn)黑素細(xì)胞黑素合成的增加,其中經(jīng)高濃度(103 nmol/L,104nmol/L)的他克莫司作用后的淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的促進(jìn)作用強(qiáng)于低濃度(101 nmol/L,102nmol/L)。
　　 經(jīng)101～104nmol/L的他克莫司作用后的淋巴細(xì)胞上清液均可以提高黑素細(xì)胞的酪氨酸酶活性,其中經(jīng)高濃度(103 nmol/L,104nmol/L)的他克莫司作用后的淋巴細(xì)胞上清液對(duì)黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性的促進(jìn)作用強(qiáng)于低濃

5、度(101 nmol/L,102 nmol/L)。
　　 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示:經(jīng)102nmol/L的他克莫司作用后的淋巴細(xì)胞,IL-6 mRNA、sIL-2R mRNA相對(duì)表達(dá)量均減少,與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05),黑素細(xì)胞經(jīng)他克莫司刺激后的淋巴細(xì)胞上清液作用后,VIT-1mRNA相對(duì)表達(dá)量增加,與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞的直