肝腎移植受者紅細(xì)胞壓積對(duì)他克莫司血藥濃度影響.pdf

1、目的：
　　以他克莫司(Tacrolimus FK506)為主要免疫抑制劑的肝臟、腎臟移植患者作為研究對(duì)象，探討長(zhǎng)期使用他克莫司的移植受者紅細(xì)胞壓積波動(dòng)對(duì)他克莫司血藥濃度檢測(cè)結(jié)果的影響。以及肝腎移植患者之間紅細(xì)胞壓積對(duì)他克莫司血藥濃度檢測(cè)結(jié)果影響的差異。血漿中游離狀態(tài)的血藥濃度是直接發(fā)揮藥效的濃度，目前廣泛使用的酶放大免疫法測(cè)定，是以全血作為檢測(cè)樣本，因此本次研究探討紅細(xì)胞壓積變化對(duì)他克莫司全血藥物濃度檢測(cè)結(jié)果影響程度，為臨床他克

2、莫司的檢測(cè)提供參考，以便更準(zhǔn)確和真實(shí)的反應(yīng)患者體內(nèi)他克莫司的血藥濃度。
　　方法：
　　第一，我們根據(jù)他克莫司體外相關(guān)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，分析他克莫司在人體紅細(xì)胞中分配的體外數(shù)據(jù)，利用藥代動(dòng)力學(xué)方程，根據(jù)患者實(shí)際檢測(cè)的他克莫司全血藥物濃度與患者的紅細(xì)胞壓積，模擬計(jì)算出他克莫司與紅細(xì)胞的結(jié)合飽和度，同時(shí)模擬計(jì)算出他克莫司血漿濃度。建立本次實(shí)驗(yàn)靈敏度高，特異性強(qiáng)，準(zhǔn)確性好的酶放大免疫法測(cè)定全血中他克莫司的血藥濃度的分析方法，并對(duì)方

3、法的專一性，精密度，準(zhǔn)確度，定量檢測(cè)范圍及線性進(jìn)行考察，對(duì)檢測(cè)方法學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)。檢測(cè)步驟:精密吸取6個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液、各濃度的質(zhì)控品，全血樣本200μl于1.5ml的離心管中（全血樣本需提前振動(dòng)混合），再依次加入200μl的沉淀劑（甲醇）和50μl（硫酸銅）的預(yù)處理試劑，立即充分渦旋混合30s，靜置2min，10800r/min離心10min，離心結(jié)束后傾倒出所有上清液置樣品管中上機(jī)測(cè)定他克莫司全血藥物濃度，同時(shí)精密吸取低、中、高不同濃度的

4、他克莫司質(zhì)控液，儀器可自動(dòng)擬合出質(zhì)控樣品和樣品的濃度結(jié)果。第二，回顧分析肝臟移植受者的給藥劑量、他克莫司全血的藥濃度與預(yù)測(cè)的他克莫司血漿的藥物濃度之間的關(guān)系。第三，回顧分析腎臟移植受者的給藥劑量、他克莫司全血的藥濃度與預(yù)測(cè)的他克莫司血漿藥物濃度之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.在數(shù)學(xué)模型模擬研究中，他克莫司的血漿濃度及全血的清除率隨紅細(xì)胞壓積變化而變化，三者間符合一定的函數(shù)關(guān)系。
　　2.用EMIT法測(cè)定質(zhì)控品Leve

5、l1（低）、Level2(中)、Level3（高）的日內(nèi)與日間精密度分別為:6.1％、3.5％、10.1％，10.6％、7.9％、9.2％;日內(nèi)與日間回收率分別是114％、95.5％、96.1％，109.3％、100.1％、103.9％;均符合《中國(guó)藥典》生物樣品檢測(cè)RSD＜15％，方法回收率在85-115％之間的規(guī)定，測(cè)定質(zhì)控品Level1（低）、Level2(中)、Level3（高）共90次，均在控制范圍內(nèi)，Level1（低）、Le

6、vel2(中)、Level3（高）質(zhì)控圖中落在x±s內(nèi)的測(cè)試點(diǎn)均超過69％。Level1（低）與Level3（高）質(zhì)控較好，但Level2(中)因質(zhì)控品批次間的質(zhì)量差異，質(zhì)控曲線出現(xiàn)小幅波動(dòng)。
　　3.回顧分析肝臟移植受者，他克莫司在全血中的藥物濃度被控制在一定治療目標(biāo)濃度范圍內(nèi)，然而，當(dāng)患者肝移植術(shù)后，Hct的變化呈現(xiàn)多樣性，根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，Hct與D/CP(他克莫司的給藥劑量與血漿藥物濃度的之比)的相關(guān)性(R=-0.149，n=

7、302)要比Hct與D/CWB(他克莫司的給藥劑量與全血藥物濃度之比)的相關(guān)性(R=-0.493，n=302)差。
　　4.回顧分析腎臟移植受者，他克莫司在全血中的藥物濃度被保持在一定治療范圍內(nèi)，然而，當(dāng)患者腎臟移植術(shù)后，Hct的變化呈現(xiàn)多樣性，根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，Hct與D/CP（他克莫司的給藥劑量與血漿藥物濃度的之比）的相關(guān)性(R=-0.556，n=463)要比Hct與D/CWB（他克莫司的給藥劑量與全血藥物濃度之比）的相關(guān)性(R=

8、-0.778，n=463)差。
　　結(jié)論：
　　EMIT法測(cè)定他克莫司的全血藥物濃度的專一性好，精密度高，是符合臨床血藥濃度檢測(cè)要求，實(shí)驗(yàn)室建立的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)可靠，實(shí)驗(yàn)監(jiān)測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。
　　對(duì)于需要長(zhǎng)期服用抗免疫排斥反應(yīng)藥物他克莫司的肝或腎移植受者來(lái)說，Hct是他克莫司藥代動(dòng)力學(xué)一個(gè)非常重要的影響因素。因此在日常給予他克莫司的藥物劑量時(shí)應(yīng)將Hct考慮進(jìn)來(lái)，特別是在紅細(xì)胞壓積較低時(shí)。同時(shí)對(duì)于肝移植的患者尤為重要。建議肝移植