脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染胞嘧啶脫氨酶基因（CD-5-FC）聯(lián)合放射線治療人直腸癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染胞嘧啶脫氨酶基因（CD5FC）聯(lián)合放射線治療人直腸癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名：呂文平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師：李世擁2002.5.12、4、8Gy不同劑量照射細(xì)胞，照射后1小時利用Lipofectin轉(zhuǎn)染細(xì)胞。36小時后倒置熒光顯微鏡觀察與比較熒光情況，同時計(jì)算轉(zhuǎn)染效率。(5)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染CD基因與5一FclOOug／ml共同孵育72小時后。采用臨床常用劑量2Gy進(jìn)行照射，照射72小時后流

2、式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率，同時設(shè)空白對照組、單純放射組(2Gy)、單純CD／5FC組3個對照組。(6)荷瘤裸鼠的制備及分組：將HR一8348細(xì)胞02ml(05107細(xì)胞／m1)接種于4—5周BALB／Cnu／nu裸鼠右側(cè)后肢外側(cè)皮下，待瘤體長至長徑達(dá)05cm后，用隨機(jī)數(shù)字法將裸鼠分為4組，每組10只。實(shí)驗(yàn)組(CD／5FC放療)：Y射線局部照射患肢，第0天起2Gy／day連續(xù)照射15天：對每個腫瘤于第0、4、8、12天放療后多點(diǎn)注射200u

3、lLipofectin—PXJ41／CD復(fù)合體；第3天始腹腔注射5FC800mg／kg／day，連續(xù)12天。單純CD／5FC治療組：除不進(jìn)行放射線照射外余同實(shí)驗(yàn)組。單純放射治療組：對裸鼠進(jìn)行屏蔽照射同實(shí)驗(yàn)組?？瞻讓φ战M：生理鹽水200u1于第0、4、8、12天瘤體多點(diǎn)注射。于治療后第30天拉頸法處死各組裸鼠。繪制荷瘤裸鼠的腫瘤生長曲線，計(jì)算瘤體積抑制率及瘤重抑制率結(jié)果(1)0、2、4、8Gy的轉(zhuǎn)染效率分別為2132％、6217％、68％

4、、7778％，放射各組與未放射組之間存在顯著差異(x!=1371，P001)，而且隨著放射劑量的增加轉(zhuǎn)染效率呈現(xiàn)上升趨勢：(2)流式細(xì)胞術(shù)顯示，細(xì)胞凋亡率(亞G，峰)分別為實(shí)驗(yàn)組是292I％，空白對照組是O72％，2Gy照射組是622％，單純CD／5FC組是1182％。實(shí)驗(yàn)組為單純放射組的470倍，為單純放射組和單純CD／5FC組之和的162倍。各組間差異有顯著性(x。11374，PO01)；(3)荷瘤鼠各組腫瘤生長曲線示：實(shí)驗(yàn)組治療第