MMP-2對(duì)人源黑色素瘤A375細(xì)胞粘附和遷移影響的研究.pdf

1、惡性黑色素瘤因具有高度遷移性和致死性而被人們熟知。明膠酶,即基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9),在黑色素瘤遷移過(guò)程中參與基底膜降解和細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu),與腫瘤惡性化程度密切相關(guān)。明膠酶不僅參與胞外基質(zhì)與基底膜重構(gòu),在血管發(fā)生、侵潤(rùn)和遷移等腫瘤發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。隨著對(duì)明膠酶研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)明膠酶不僅由腫瘤細(xì)胞分泌并且可以由基質(zhì)細(xì)胞分泌,不僅能與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白相互作用,而且能與包括整合素在內(nèi)的多種非基質(zhì)蛋

2、白相互作用。
　　 在黑色素瘤中,整合素αvβ3(integrin)是一類重要的異二聚體跨膜糖蛋白,能夠與含有RGD片段的配體結(jié)合,通過(guò)這種結(jié)合αvβ3可以介導(dǎo)細(xì)胞外配體與胞內(nèi)骨架蛋白和各種信號(hào)途徑間的信號(hào)傳遞。然而,整合素αvβ3與MMP-2間的識(shí)別是通過(guò)MMP-2羧基端的PEX區(qū)而非RGD區(qū),對(duì)于MMP-2是否能通過(guò)與αvβ3的這種結(jié)合而發(fā)揮一定的信號(hào)傳遞作用目前還沒(méi)有報(bào)道。
　　 在本研究中,我們首先利用明膠酶譜法

3、對(duì)A375細(xì)胞中明膠酶的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè),證實(shí)在人源黑色素瘤A375細(xì)胞中MMP-2和MMP-9均有所表達(dá)。通過(guò)使用MMP廣譜抑制劑對(duì)A375細(xì)胞鋪展和遷移進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn),MMP-2對(duì)A375細(xì)胞的影響比較顯著。通過(guò)對(duì)A375細(xì)胞鋪展過(guò)程中MMP-2和F—actin進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)MMP-2與肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的變化有一定相關(guān)性。同時(shí),免疫熒光標(biāo)記觀察發(fā)現(xiàn)MMP-2和整合素αvβ3在A375細(xì)胞懸浮、鋪展和遷移三種狀態(tài)下均有共定位現(xiàn)象。