羥基乙酸用于肝癌瘤內(nèi)注射的藥效及脂質(zhì)體制劑研究.pdf

1、經(jīng)皮肝癌瘤內(nèi)注射藥物是治療肝癌的一種重要手段，乙酸是目前應(yīng)用的療效突出的肝癌瘤內(nèi)注射治療藥物。但是經(jīng)皮乙酸注射在治療肝癌的過程中仍存在著對腫瘤的滲透能力有限，難以制成緩釋制劑，注射過程中引起患者疼痛的局限性。為了克服這一缺點，本文將羥基乙酸作為一種高效的化學(xué)滅活劑引入到經(jīng)皮瘤內(nèi)注射治療肝癌中，通過對腫瘤細(xì)胞的體外抑制、大鼠的肝壞死及裸鼠移植性肝癌的治療研究，證實羥基乙酸具有很強(qiáng)的抑制腫瘤作用。同時，將羥基乙酸做成脂質(zhì)體，并制備了殼聚糖修

2、飾的脂質(zhì)體，考察了包封率及體外釋放，并研究了羥基乙酸脂質(zhì)體制劑對裸鼠移植性腫瘤的治療作用。 在羥基乙酸溶液的藥效考察中，制備了不同濃度的羥基乙酸溶液，進(jìn)行了細(xì)胞、大鼠和裸鼠實驗，并將其與同濃度的乙酸的藥效進(jìn)行比較。通過細(xì)胞實驗，發(fā)現(xiàn)羥基乙酸對肝腫瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用；通過大鼠的肝損傷實驗，發(fā)現(xiàn)與同濃度的乙酸相比，羥基乙酸導(dǎo)致大鼠肝臟壞死的最大橫截面的平均直徑更大(P＜0.05)；通過裸鼠移植性腫瘤的治療實驗，經(jīng)皮瘤內(nèi)注射羥基乙

3、酸后裸鼠的平均直徑較同濃度的乙酸小(P＜0.05)，同時光鏡以及電鏡也進(jìn)一步證實了羥基乙酸更強(qiáng)的抑制腫瘤作用。 在本文中，確定了羥基乙酸的含量測定方法。采用離子對反相色譜法，在210 nm下檢測，以包含0.002 M四丁基碘化銨的0.025 M磷酸鹽緩沖液(pH6.2)：甲醇(98：2)作為流動相，確定羥基乙酸標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=10878+408X，r=0.998，在0.3 mg/ml～30mg/ml范圍內(nèi)，羥基乙酸峰面積與濃度線性

4、關(guān)系良好。采用逆相蒸發(fā)法制備了羥基乙酸脂質(zhì)體，并通過單因素考察和正交試驗優(yōu)化了羥基乙酸脂質(zhì)體的處方工藝，并對優(yōu)選處方的粒徑、包封率及體外釋放進(jìn)行了考察。結(jié)果粒徑在1～5μm范圍內(nèi)。所制得的最優(yōu)處方和工藝的藥脂比(w/w)為3：5，磷脂與膽固醇的比例(w/w)為2：1，水相與有機(jī)相之比(v/v)為1：5，水浴溫度為45℃，包封率為(38.6±1.4)％，在8h內(nèi)可緩慢釋放。 同時制備了殼聚糖修飾的羥基乙酸脂質(zhì)體(殼聚糖包衣的羥基乙

5、酸脂質(zhì)體和載有殼聚糖的羥基乙酸脂質(zhì)體)，考察其形態(tài)、粒徑、Zeta電位、包封率和體外釋放。體外釋藥結(jié)果經(jīng)殼聚糖修飾的脂質(zhì)體比未經(jīng)修飾的脂質(zhì)體有更好的緩釋作用。 在羥基乙酸脂質(zhì)體制劑在裸鼠移植性腫瘤的治療作用考察中，30％乙酸組、30％羥基乙酸組、羥基乙酸脂質(zhì)體組及殼聚糖修飾的羥基乙酸脂質(zhì)體組均為每7天注射1次，每次注射0.15ml，共注射2次。結(jié)果由裸鼠腫瘤的平均直徑和病理切片結(jié)果可知羥基乙酸脂質(zhì)體組及殼聚糖修飾的羥基乙酸脂質(zhì)體