慢病毒介導Lipin1表達對糖尿病大鼠周圍神經(jīng)病變的影響.pdf

1、背景：糖尿病周圍神經(jīng)病變(diabetic peripheral neuropathy, DPN)是糖尿病(diabeticmellitus，DM)最常見的慢性并發(fā)癥之一，其患病率達50％，是造成糖尿病足和截肢的主要原因，嚴重影響患者的生活質(zhì)量，目前臨床上尚無有效的治療方法。目前對DPN發(fā)病機制的研究多集中在多元醇通路的代謝異常、糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)的積聚、氧化應激、神經(jīng)營養(yǎng)因子等。脂素(Lipin)由脂素基因(LPIN)表達產(chǎn)生

2、，是一種新發(fā)現(xiàn)的具有雙向調(diào)控功能的一個家族，可調(diào)控身體脂肪代謝，主要包括Lipin1、Lipin2和Lipin3。脂素Lipin1作為一種新的脂肪因子，在機體糖脂代謝中起著重要作用。Lipin1主要表達于白色脂肪組織及肌肉，同時也表達于其他組織如周圍神經(jīng)、肝臟及腎臟。有研究發(fā)現(xiàn)Lipin1缺乏是造成周圍神經(jīng)病變的原因之一，主要機制在于Lipin1缺乏導致構成神經(jīng)外膜的脂肪墊以及雪旺細胞中的磷脂酸磷酸酯酶活性缺乏，髓磷脂合成減少，神經(jīng)傳導

3、速度減慢。
　　目的：通過構建糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠模型，將攜帶Lipin1的慢病毒載體轉染糖尿病大鼠，觀察糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)的神經(jīng)電生理及病理形態(tài)學變化，探討Lipin1對糖尿病大鼠周圍神經(jīng)早期病變的影響。方法:36只雄性Wistar大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)8周后給予小劑量（30 mg/kg）鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射，成功誘導其成為2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)大鼠模型，隨機分為空載體組、

4、Lipin1過表達組，另選擇12只健康大鼠作為正常對照組。Lipin1過表達(LV-Lipin1)組、空載體（LV-control）組分別通過尾靜脈注射lipin1慢病毒載體(5×107 TU)和空慢病毒載體(5×107 TU)，每月1次，連續(xù)2次。8周后對照觀察各組大鼠血糖(BG)、體質(zhì)量(BW);應用甲苯胺藍染色，通過光鏡及透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)病理形態(tài)學改變;應用免疫組化法測定Lipin1表達。數(shù)據(jù)均采用應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件

5、，計量資料采用(x)±s，多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK法，P＜0.05為差異有統(tǒng)汁學意義。
　　結果：①至干預結束時，正常組體質(zhì)量呈生理性正常加重，血糖正常?？蛰d體組大鼠血糖高于正常組，其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。Lipin1過表達組血糖、體質(zhì)量較空載體組無顯著差異（P＞0.05）。②糖尿病大鼠成模2月時，免疫組化觀察坐骨神經(jīng)Lipin1表達，空載體組較正常對照組坐骨神經(jīng)縱切面Lipin1表達量明顯

6、減少;Lipin1過表達組較空載體組Lipin1表達量明顯增多。③糖尿病大鼠造模后4w即可出現(xiàn)神經(jīng)傳導速度減慢，Lipin1轉染后8周，Lipin1過表達組神經(jīng)傳導速度較空載體組明顯改善(P＜0.05）。④糖尿病大鼠造模后8w，空載體組較正常對照組的神經(jīng)纖維直徑、密度、面積均減少，Lipin1過表達組以上病變較空載體組顯著減輕(P＜0.05)。
　　結論：⑴實驗性糖尿病大鼠成模后4w發(fā)現(xiàn)周圍神經(jīng)病變，隨病程延長神經(jīng)損傷逐漸加重。⑵