豬常用的抗菌藥生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)(BCS)分類研究.pdf

1、生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)(Biopharmaceutics Classification System，BCS)是根據(jù)溶解性和滲透性對藥物進(jìn)行分類的一種科學(xué)框架。該分類系統(tǒng)將藥物按照其溶解性和滲透性分為四類，并以此預(yù)測藥物在體內(nèi)的吸收及其影響因素。根據(jù)BCS理論，其中第Ⅰ類藥物由于具有良好的溶解性和滲透性，其口服制劑體外的溶出行為對體內(nèi)的吸收影響較小，在申請?jiān)擃愃幬锏目诜籴屩苿r(shí)，可用考慮豁免生物等效性實(shí)驗(yàn)(FDA，2000)。該分類系統(tǒng)陸

2、續(xù)被歐洲藥品管理局(EMA)、美國食品藥品管理局(FDA)、世界衛(wèi)生組織(WHO)等組織所應(yīng)用，作為口服仿制藥申請豁免生物等效性試驗(yàn)的理論基礎(chǔ)。
　　BCS的應(yīng)用在藥物的研發(fā)尤其是仿制過程中節(jié)約了大量的時(shí)間和資金，如果將其合理應(yīng)用到獸藥研發(fā)體系，那將會為獸藥仿制藥的研發(fā)節(jié)約大量的時(shí)間和資金，從而推動我國獸藥產(chǎn)品的研究開發(fā)。本研究擬開展豬常用口服抗菌藥物的BCS分類體系研究，建立BCS分類體系并根據(jù)各藥的溶解性和滲透性將其進(jìn)行BCS

3、分類，研究將有效的推動豬口服仿制藥的發(fā)展，也將為其他動物仿制藥的生物等效性試驗(yàn)豁免起到一個(gè)先導(dǎo)的作用。
　　1.豬常用抗菌藥物的溶解性測定
　　實(shí)驗(yàn)依據(jù)FDA對人藥溶解性測量體系中的各項(xiàng)規(guī)定并結(jié)合豬體內(nèi)的實(shí)際情況，建立豬常用藥物生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)(BCS)溶解性測量條件:溫度為39±1℃，pH值為1～8，溶劑為去離子水配置的緩沖溶液（用鹽酸/氯化鉀、醋酸/醋酸鈉、磷酸二氫鉀/氫氧化鈉分別作酸性、弱酸性、弱堿性pH下的緩沖液）

4、。參照BCS的溶解性測定方法:將32種豬常用的口服藥物加入由去離子水配置的不同pH值(在動物的胃腸道pH值內(nèi)取點(diǎn)，取pH=(1、3、5、7、8)的緩沖液溶劑中，過量加入，用2010版藥典規(guī)定的搖籃法進(jìn)行溶解，平衡24h后，取上清液紫外分光光度計(jì)測定中藥物的濃度，每個(gè)點(diǎn)三個(gè)重復(fù)。
　　依次測定所選擇的32種豬常用的抗菌藥物，在不同pH值的緩沖溶液中的最小飽和溶解度及對應(yīng)的溶劑pH值:土霉素0.630±0.021 mg/mL，(pH=

5、5);鹽酸土霉素109.714±1.58mg/mL，(pH=5);鹽酸四環(huán)素34.551±2.41 mg/mL，QH=8）;鹽酸金霉素2.359±0.24mg/mL，(pH=1);鹽酸多西環(huán)素60.462±1.48mg/mL，(pH=8);酒石酸泰樂菌素267.478±4.67mg/mL，(pH=8);吉他霉素205.430±5.42mg/mL，(pH=8);甲硝唑1.963±0.41mg/mL，(pH=8);替米考星1.285±0.2

6、3mg/mL，(pH=8);磷酸替米考星308.373±7.88mg/mL，(pH=3);硫酸粘菌素201.804±2.11 mg/mL，(pH=8);磺胺嘧啶0.116±0.02 mg/mL，（pH=3）;磺胺喹喔啉鈉165.270±2.48 mg/mL，(pH=7）;磺胺對甲氧嘧啶0.150±0.013mg/mL，(pH=5);磺胺間甲氧嘧啶0.164±0.014mg/mL，(pH=5）;磺胺脒4.611±0.037mg/mL，(p

7、H=1）;磺胺甲噁唑0.935±0.14mg/mL，(pH=3);乙酰甲喹5.257±0.86mg/mL，(pH=3);喹乙醇11.987±0.99mg/mL，(pH=8);地美硝唑12.807±1.75mg/mL，(pH=7);阿莫西林52.388±5.66mg/mL，(pH=8）、硫酸慶大霉素106.303±4.98mg/mL，(pH=5）;硫酸新霉素106.303±4.98mg/mL，(pH=1);鹽酸大觀霉素67.352±4.3

8、3mg/mL，(pH=1);甲砜霉素3.158±0.45mg/mL，(pH=3）;氟苯尼考1.173±0.24mg/mL，(pH=3);恩諾沙星0.779±0.17mg/mL，(pH=7);鹽酸沙拉沙星0.291±0.007mg/mL，(pH=1）;二甲氧嘧啶、紅霉素、硫氰酸紅霉素三種藥物溶解度過低，溶液吸光值無法檢測。
　　2.豬常用抗菌藥物的滲透性測定
　　實(shí)驗(yàn)依據(jù)FDA對人藥滲透性測量方法并結(jié)合豬體內(nèi)的實(shí)際情況，建立豬

9、用抗菌藥物滲透性測量方法。選取豬的空腸上皮細(xì)胞IPEC-J2，使用美國康寧公司生產(chǎn)的transwell細(xì)胞培養(yǎng)小室進(jìn)行培養(yǎng)，建立藥物滲透性測定的單層細(xì)胞模型，用顯微鏡及酚紅標(biāo)記物驗(yàn)證細(xì)胞模型的完整性后，transwell嵌套上層供應(yīng)池加入藥物，另設(shè)置一陽性對照組，即嵌套膜上無細(xì)胞模型，且在供應(yīng)池中加入同等濃度藥物。將Transwell板于恒溫?fù)u床(37℃，50r/min)中孵育，每個(gè)樣品三個(gè)重復(fù)，120min后從嵌套下端取樣，然后放入-

10、20℃冰箱中保存待測。樣品進(jìn)行處理后，利用建立的藥物HPLC測量方法進(jìn)行含量測定。根據(jù)初始濃度和測定濃度計(jì)算出表觀滲透系數(shù)Peff。
　　32種豬常用的抗菌藥物測定的表觀滲透系數(shù)Peff(cm/s)值如下:土霉素0.453×10-6cm/s;鹽酸土霉素0.913×10-6cm/s;鹽酸四環(huán)素0.977×10-6cm/s;鹽酸金霉素0.714×10-6cm/s;鹽酸多西環(huán)素2.194×10-6cm/s;酒石酸泰樂菌素2.226×10

11、-6cm/s;吉他霉素2.114×10-6cm/s;甲硝唑1.553×10-6cm/s;替米考星2.055×10-%m/s;磷酸替米考星0.985×10-6cm/s;磺胺嘧啶2.045×10-%m/s;磺胺喹喔啉鈉1.093×10-6cm/s;磺胺對甲氧嘧啶1.506×10-6cm/s;磺胺間甲氧嘧啶1.578×10-6cm/s;磺胺脒1.094×10-6cm/s;磺胺甲噁唑1.746×10-6cm/s;二甲氧嘧啶0.472×10-6c

12、m/s;乙酰甲喹2.025×10-6cm/s;喹乙醇2.571×10-6cm/s;地美硝唑1.375×10-6cm/s;阿莫西林0.626×10-6cm/s;硫酸慶大霉素0.126×10-6cm/s;甲砜霉素2.522×10-6cm/s;氟苯尼考2.479×10-6cm/s;恩諾沙星2.524×10-6cm/s;鹽酸沙拉沙星2.189×10-6cm/s;紅霉素0.745×10-6cm/s;硫氰酸紅霉素2.223×10-10-6cm/s;

13、林可霉素0.739×10-6cm/s;硫酸粘菌素、硫酸新霉素、鹽酸大觀霉素三種藥物滲透含量過低，低于其最低檢測限，無法檢測。
　　3.豬常用藥物BCS分類研究
　　建立豬常用藥物BCS分類體系，高溶解性:在39℃，藥物的單次給藥最高劑量均完全溶解于pH1-8體積為1L水溶性介質(zhì)中，則判定為高溶解性的藥物。高滲透性:藥物的有效滲透系數(shù)Peff＞2×10-6cm/s時(shí)，則判定該藥物為高滲透性藥物。
　　將實(shí)驗(yàn)所測得的藥物溶

14、解性與滲透性按照BCS判定體系進(jìn)行歸類，32種藥物中，第1類高溶解度—高滲透性藥物為5種，鹽酸多西環(huán)素、吉他霉素、恩諾沙星、喹乙醇、乙酰甲喹;第Ⅱ低溶解度—高滲透性類藥物6種，替米考星、磺胺嘧啶、甲砜霉素、氟苯尼考、鹽酸沙拉沙星、硫氰酸紅霉素;第Ⅲ類高溶解度—低滲透性藥物10種，鹽酸土霉素、鹽酸大觀霉素、磷酸替米考星、酒石酸泰、樂菌素硫酸粘菌素、磺胺喹喔啉鈉、阿莫西林、硫酸慶大霉素、硫酸新霉素、鹽酸四環(huán)素;第Ⅳ類低溶解度—低滲透性藥物1

15、1種，土霉素、鹽酸金霉素、甲硝唑、磺胺對甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺脒、林可霉素、二甲氧嘧啶、地美硝唑、紅霉素、磺胺甲噁唑。
　　結(jié)合FDA對BCS的相關(guān)規(guī)定，若非專利藥品能在體外特定的試驗(yàn)中被證實(shí)為有高溶解度和高滲透性藥物即BCS第1類，輔料不影響主藥的吸收速度和程度的條件下，其速釋口服固體制劑(30分鐘內(nèi)釋放85％以上)可以申請免除體內(nèi)生物等效性。鹽酸多西環(huán)素、吉他霉素、恩諾沙星、喹乙醇、乙酰甲喹五種原料藥為豬常用藥物生物藥