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文檔簡介
1、目的:1.探索骨髓間充質干細胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)移植到聚乙交酯-聚己內酯共聚物(Poly(glycolic acid)/Poly(e-Caprolactone)Co-polymer,PGCL)支架上構建BMMSCs-PGCL補片的可行性。
2.觀察體外構建BMMSCs-PGCL補片在正常心肌組織和梗死后心肌組織生長情況。
方法:雌性Sprag
2、ue-Dawley(SD)大鼠(體重250g-300g)的BMMSCs采用貼壁分離篩選法進行分離、培養(yǎng),選取第三代進行體外4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)標記。制作BMMSCs懸液(2×106個/cm2)種植于PGCL上形成BMMSCs-PGCL補片。培養(yǎng)48小時,在電鏡下觀察;H&E染色后在光學顯微鏡下觀察。選擇雌性SD大鼠(體重250g-300g),結扎左冠狀動脈
3、前降支制作心肌梗死(Myocardial infarction,MI)模型。把BMMSCs-PGCL補片植入到正常心肌組織和梗死后心肌組織培養(yǎng)4周。4周后取上述組織通過組織病理學檢查,了解BMMSCs在PGCL支架上存活情況。
結果:1.原代培養(yǎng)結果通過上述方法培養(yǎng)的BMMSCs貼壁生長,形狀為梭形,呈漩渦狀排列。
2.體外構建的BMMSCs-PGCL補片分別在光學顯微鏡和電鏡下觀察結果:BMMSCs在PGC
4、L支架中呈三維生長,細胞與支架黏附良好。
3.BMMSCs-PGCL補片植入正常心肌組織的觀察結果:在激光共聚焦顯微鏡下,對比觀察移植后1周和第5周切片顯示:同第1周相比,第5周的心肌組織內出現DAPI標記的BMMSCs。
4.BMMSCs-PGCL補片植入梗死后心肌組織觀察結果:在激光共聚焦顯微鏡下:梗死區(qū)出現DAPI標記的BMMSCs。H&E染色圖片所示:梗死區(qū)出現BMMSCs。
結論:1.
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