體外構建的工程化骨髓間充質干細胞在體內心肌組織生存研究.pdf

1、目的：1.探索骨髓間充質干細胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs)移植到聚乙交酯-聚己內酯共聚物(Poly(glycolic acid)/Poly(e-Caprolactone)Co-polymer，PGCL)支架上構建BMMSCs-PGCL補片的可行性。
　　 2.觀察體外構建BMMSCs-PGCL補片在正常心肌組織和梗死后心肌組織生長情況。
　　 方法：雌性Sprag

2、ue-Dawley(SD)大鼠(體重250g-300g)的BMMSCs采用貼壁分離篩選法進行分離、培養(yǎng)，選取第三代進行體外4'，6-二脒基-2-苯基吲哚(4'，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI)標記。制作BMMSCs懸液(2×106個/cm2)種植于PGCL上形成BMMSCs-PGCL補片。培養(yǎng)48小時，在電鏡下觀察；H&E染色后在光學顯微鏡下觀察。選擇雌性SD大鼠(體重250g-300g)，結扎左冠狀動脈

3、前降支制作心肌梗死(Myocardial infarction，MI)模型。把BMMSCs-PGCL補片植入到正常心肌組織和梗死后心肌組織培養(yǎng)4周。4周后取上述組織通過組織病理學檢查，了解BMMSCs在PGCL支架上存活情況。
　　 結果：1.原代培養(yǎng)結果通過上述方法培養(yǎng)的BMMSCs貼壁生長，形狀為梭形，呈漩渦狀排列。
　　 2.體外構建的BMMSCs-PGCL補片分別在光學顯微鏡和電鏡下觀察結果：BMMSCs在PGC

4、L支架中呈三維生長，細胞與支架黏附良好。
　　 3.BMMSCs-PGCL補片植入正常心肌組織的觀察結果：在激光共聚焦顯微鏡下，對比觀察移植后1周和第5周切片顯示：同第1周相比，第5周的心肌組織內出現DAPI標記的BMMSCs。
　　 4.BMMSCs-PGCL補片植入梗死后心肌組織觀察結果：在激光共聚焦顯微鏡下：梗死區(qū)出現DAPI標記的BMMSCs。H&E染色圖片所示：梗死區(qū)出現BMMSCs。
　　 結論：1.