缺血-再灌注大鼠腦內(nèi)軸突生長抑制因子受體NgR的表達(dá)及其干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)損傷后軸突不能再生的主要原因是由于髓鞘抑制因子的存在，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的抑制蛋白有Nogo-A、髓鞘相關(guān)糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)和少突膠質(zhì)細(xì)胞-髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte-myelinglycoprotein,OMgp)，三者擁有一個(gè)共同的受體(Nogo-66 receptor,NgR)。NgR是一

2、種和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)相連接的軸突表面蛋白，它和三種抑制因子結(jié)合后，通過跨膜的協(xié)同受體P75將抑制性信號(hào)傳導(dǎo)至細(xì)胞內(nèi)，從而限制軸突的再生。以前的研究發(fā)現(xiàn)電刺激小腦頂核可以保護(hù)腦組織免受缺血性損傷。本課題的研究目的就是探索在大鼠局灶性腦缺血后的不同時(shí)間點(diǎn)，NgR在缺血側(cè)皮質(zhì)及海馬的表達(dá)情況及表達(dá)規(guī)律，以及電刺激小腦頂核(electrostimulationof fastigi

3、al nucleu,FNS)對(duì)缺血后腦皮質(zhì)和海馬中NgR表達(dá)的影響和意義。 方法 成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，采用線栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈缺血(middle cerebral artery occlusion，MCAO)/再灌注模型，隨機(jī)分為6組，分別為假手術(shù)組、再灌注后12h、24h、1w、2w、3w組，然后通過HE染色進(jìn)行病理觀察神經(jīng)元細(xì)胞的形態(tài)，逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法

4、檢測(cè)NgR mRNA的表達(dá)情況，免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)NgR蛋白及軸突的生長狀況。再取成年雄性SD大鼠72只建立模型，隨機(jī)分為假手術(shù)組(對(duì)照組)、單純?nèi)毖?再灌注組(模型組)和缺血/再灌注+電刺激小腦頂核組(FNS干預(yù)組)。FNS處理組在缺血2h后再灌注時(shí)立即給予電刺激小腦項(xiàng)核1h，在第24h和2w時(shí)觀察和上述相同的指標(biāo)。 結(jié)果 NgR的表達(dá)在缺血/再灌注24h和2w增加最明顯，和單純?nèi)毖?再灌注組相比，F(xiàn)NS干預(yù)組Ng