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1、該研究人18周流產(chǎn)的人胎腦組織提取總RNA,利用逆轉(zhuǎn)錄取合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)獲得人親肝素性促軸突生長(zhǎng)因子(HBNF)的編碼基因,與質(zhì)粒pGEM-3zf(+)重組,然后與穿梭表達(dá)載體pPIC9K重組,鑒定篩選得以含HBNF cDNA基因的陽性克隆.序列分析表明目的基因序列與基因庫資料完全一致,在重組表達(dá)載體中位于α因子分泌信號(hào)序列的下游,與α因子開放閱讀框相連.用此重組表達(dá)載體通過電穿孔法經(jīng)酵母菌株GS115,在不含組氨酸的MD平
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