人參皂甙Rd對正常及次聲作用后成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生的影響.pdf

1、人參皂甙(Ginsenoside)是人參的主要藥理活性成分，目前，人們已經(jīng)從人參植物中至少分離出40多種人參皂甙單體。人參皂甙Rd為人參皂甙二醇型組中的重要的單體之一，具有一定的藥理作用。多項研究表明，人參皂苷可易化學習和記憶的獲得、鞏固和再現(xiàn)，具有提高神經(jīng)功能可塑性的作用。目前認為，成年動物的學習和記憶與海馬齒狀回存在的持續(xù)性神經(jīng)發(fā)生有著密切的關(guān)聯(lián)，因此提示人參皂甙很有可能參與到神經(jīng)發(fā)生的過程中。
　　神經(jīng)干細胞增殖、存活和分化

2、的過程稱為神經(jīng)發(fā)生(Neurogenesis)。近年來的大量實驗研究證實多種動物（包括哺乳動物）成體腦組織中存在著進行性的神經(jīng)發(fā)生，可產(chǎn)生新的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞。其中，海馬齒狀回是目前研究最多的神經(jīng)發(fā)生區(qū)之一。目前認為海馬在成年后的神經(jīng)發(fā)生參與記憶的形成。本實驗通過腹腔注射不同劑量人參皂甙Rd，對正常成年大鼠進行干預(yù)，通過免疫組化方法觀察注射后不同時間點大鼠SGZ神經(jīng)干細胞的增殖、分化、遷移的情況，探究人參皂甙Rd對神經(jīng)發(fā)生的影響。<

3、br>　　神經(jīng)發(fā)生受到多種環(huán)境因素的影響，我們前期研究中發(fā)現(xiàn)一定強度的次聲聲波可以明顯抑制大鼠SGZ神經(jīng)干細胞的增殖。次聲(Infrasound)是由物體機械振動產(chǎn)生的頻率為0.0001～20Hz的聲波，廣泛存在于自然界和社會環(huán)境中。高強度次聲對人體有害，是生產(chǎn)噪聲和公共噪聲的重要組成部分。腦是次聲作用的重要靶器官，對次聲作用非常敏感。研究表明，次聲可引起腦內(nèi)多個部位結(jié)構(gòu)、功能、神經(jīng)遞質(zhì)代謝等多方面的改變，其作用機制特殊，過程復(fù)雜。本實

4、驗通過觀察人參皂甙Rd對次聲作用后成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生的影響，探討人參皂甙Rd對次聲損傷的防護作用，為次聲的防治研究提供實驗依據(jù)。
　　本實驗分別觀察了人參皂甙Rd對正常及次聲作用成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生的影響。實驗一：對正常成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠腹腔注射人參皂甙Rd，在給藥后不同時間點處死大鼠，處死前各組大鼠腹腔注射BrdU3次，以BrdU免疫組織化學法檢測各組海馬齒狀回內(nèi)神經(jīng)干細胞的變化情況。

5、3d，7d，14d處死組大鼠用來觀察神經(jīng)干細胞增殖的情況，34d處死組大鼠用來觀察神經(jīng)干細胞分化遷移的情況。實驗二：成年雄性SD大鼠隨機分為對照組、假次聲組、次聲組和次聲+人參皂甙Rd組，次聲組和次聲+人參皂甙Rd組動物置于次聲壓力倉(16Hz，130dB)內(nèi)連續(xù)作用7d(2h/d)，次聲結(jié)束后進行觀察。觀察方法同實驗一。
　　本實驗結(jié)果如下：
　　1．人參皂甙Rd對神經(jīng)干細胞增殖的影響：各組大鼠齒狀回BrdU+細胞主要分布

6、在SGZ，呈單個或叢集性分布，形態(tài)不規(guī)則。實驗一：與對照組相比，人參皂甙Rd作用后，SGZBrdU+細胞在給藥結(jié)束后3d與7d處理組均有明顯增加，而在14d處理組恢復(fù)正常。實驗二：給予人參皂甙Rd后，SGZBrdU+細胞數(shù)自第3d開始即顯著高于次聲組，7d時增加更為明顯，促增殖作用至次聲后14d隨著次聲組BrdU+細胞數(shù)的回升而逐漸消失。
　　2．人參皂甙Rd對神經(jīng)干細胞分化的影響：免疫熒光雙標記染色發(fā)現(xiàn)，各組BrdU+細胞大多(

7、70％)與神經(jīng)元特異性標記物NeuN共存，很少與星型膠質(zhì)細胞特異性標記物GFAP共存，提示人參皂甙Rd對神經(jīng)干細胞的分化趨勢無影響。
　　3．人參皂甙Rd對神經(jīng)干細胞遷移的影響：34d組大鼠齒狀回BrdU+細胞大多呈單個分布，且許多已從SGZ移行至GCL;細胞核較SGZ中要大，表現(xiàn)出成熟顆粒細胞的特征，呈圓形。次聲損傷及人參皂甙Rd作用后，大鼠海馬齒狀回均未發(fā)現(xiàn)顆粒細胞的異位遷移。
　　本實驗結(jié)論如下：
　　人參皂甙R