大鼠腦缺血再灌注和丁苯酞干預(yù)后海馬組織中Smad4的表達(dá)變化及Smad4在高爾基體定位的研究.pdf

1、目的:觀察大鼠腦缺血再灌注損傷以及丁苯酞干預(yù)后Smad4的表達(dá)變化,以及Smad4亞細(xì)胞定位,探討丁苯酞的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
　　方法:(1)分組:健康SD大鼠50只,隨機(jī)分為正常對照組、假手術(shù)組、缺血再灌注組(I/R)、丁苯酞干預(yù)組(NI/R);觀察在腦缺血再灌注后6h、1d、3d、7d的各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Smad4的表達(dá):(2)模型制作:缺血再灌注組大鼠予以夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈15min以及硝普鈉控制低血壓后再灌注;假手術(shù)組大鼠僅分離雙側(cè)頸

2、總動(dòng)脈不予以夾閉;丁苯酞干預(yù)組在實(shí)驗(yàn)前兩天開始丁苯酞灌胃(80mg/kg,BID)直到處死,余步驟同缺血再灌注組;(3)HE染色觀察病理變化;(4)免疫組織化學(xué)染色觀察Smad4表達(dá)變化。(5)采用免疫熒光共聚焦的方法觀察Smad4在額葉皮質(zhì)細(xì)胞高爾基體的定位情況。全部數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:(1)HE染色:1.大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞減少,神經(jīng)元變性、壞死,這種改變在缺血再灌注后3天及7天最為明顯。丁

3、苯酞干預(yù)后,干預(yù)組中存活的海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞較非干預(yù)組明顯增加。(2)免疫組化:Smad4在神經(jīng)細(xì)胞胞核及胞質(zhì)中均有陽性表達(dá)。正常對照組與假手術(shù)組大鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元中Smad4陽性細(xì)胞表達(dá)較少,Smad4在缺血再灌注損傷后在各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)顯著上調(diào),1d時(shí)明顯升高,在3d和7d時(shí)達(dá)到高峰,與對照組比較,有顯著性差異(P＜0.05)。丁苯酞干預(yù)組Smad4表達(dá)在各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)較對照組表達(dá)上調(diào),趨勢與缺血再灌注組一致,陽性率明顯低于缺血再灌