Smad4信號(hào)通路蛋白與Cortactin蛋白在卵巢腫瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的
　　本課題旨在檢測(cè)卵巢上皮性腫瘤中Smad4及Cortactin基因及蛋白的表達(dá)，探討上皮性卵巢癌組織中Smad4、Cortactin的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系，以及組織中Smad4及Cortactin表達(dá)的相關(guān)性。進(jìn)一步探索上皮性卵巢癌發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中Smad4信號(hào)通路的作用，以及Smad4對(duì)于細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的影響，為判斷預(yù)后提供依據(jù)，為臨床治療提供新靶點(diǎn)。
　　方法
　　本研究采用上皮性卵巢癌為研究對(duì)象，以卵巢良性

2、上皮性腫瘤、正常卵巢組織為對(duì)照組，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(Method of Real-time quantitative reversetranscriPtion Polymerase chain reaction)檢測(cè)Smad4及Cortactin mRNA的表達(dá)情況，免疫組織化學(xué)SP三步法檢測(cè)Smad4及Cortactin蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果
　　1.上皮性卵巢癌組織中Smad4 mRNA的相對(duì)含量

3、低于卵巢良性上皮性腫瘤及正常對(duì)照(P＜0.05)，Smad4 mRNA在卵巢良性上皮性腫瘤組織中的表達(dá)是上皮性卵巢癌組織中的5.75倍。Smad4 mRNA表達(dá)與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)、FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹水呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。
　　2.上皮性卵巢癌組織中Cortactin mRNA的相對(duì)含量高于卵巢良性上皮性腫瘤及正常對(duì)照(P＜0.05);Cortactin mRNA表達(dá)與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)、FIGO分期相關(guān)(P＜0.05

4、)，與年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹水無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　3.Smad4蛋白主要定位于腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)，部分位于細(xì)胞核，呈現(xiàn)出棕黃色或棕褐色顆粒。上皮性卵巢癌組織中Smad4蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為44.00％，呈弱陽(yáng)性;而卵巢良性上皮性腫瘤與正常對(duì)照組織中Smad4蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為70.00％以上，表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性。Smad4蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)、FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹水有關(guān)(P＜0.05)。
　　4.Cortactin

5、蛋白定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜，部分位于細(xì)胞核。上皮性卵巢癌組織中Cortactin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為73.30％，表達(dá)多為強(qiáng)陽(yáng)性;卵巢良性上皮性腫瘤及正常對(duì)照組織中Cortactin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率不足25％，呈弱陽(yáng)性;Cortactin蛋白的表達(dá)僅與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)有關(guān)(P＜0.05)，與FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腹水及年齡無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　5.Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示:上皮性卵巢癌組織中Smad4和Cor

6、tactinmRNA表達(dá)之間存在中度負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.541，P=0.005）;而組織中Smad4和Cortactin蛋白表達(dá)之間呈高度線性負(fù)相關(guān)（r=-0.738，P=0.000）。
　　6.上皮性卵巢癌Smad4蛋白表達(dá)陽(yáng)性者平均生存期為40.6±4.2個(gè)月(95％ CI，35.3-43.0月)，陰性表達(dá)者平均生存期為26.1±5.3個(gè)月（95％CI，24.7-30.6月），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.026)，Cortac

7、tin蛋白表達(dá)陽(yáng)性者平均生存期為19.5±1.2個(gè)月(95％CI，14.6-21.4月)，陰性表達(dá)者平均生存期為34.5±4.3個(gè)月（95％CI，22.1-25.9月），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.017)。
　　7.單因素生存分析顯示:上皮性卵巢癌患者Smad4陽(yáng)性表達(dá)者較陰性表達(dá)者具有顯著生存優(yōu)勢(shì)(x2=4.944，P=0.026)。而Cortactin陰性表達(dá)者較陽(yáng)性表達(dá)者具有顯著生存優(yōu)勢(shì)（x2=5.739，P=0.017）。

8、COX回歸模型進(jìn)行多因素分析，兩者均為上皮性卵巢癌的獨(dú)立預(yù)后因素，其中smad4陰性表達(dá):P=0.001 RR=5.412(95％CI，2.719-6.112)，Cortactin陽(yáng)性表達(dá):P=0.001 RR=6.452(95％CI，2.289-7.512)。
　　結(jié)論
　　1.上皮性卵巢癌組織中Smad4 mRNA及蛋白表達(dá)存在缺失現(xiàn)象，Smad4表達(dá)缺失與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)、FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹水呈負(fù)相關(guān)，單因素

9、生存分析顯示Smad4陽(yáng)性表達(dá)者具有顯著生存優(yōu)勢(shì)，多因素分析顯示Smad4表達(dá)為獨(dú)立預(yù)后因素。說(shuō)明Smad4作為TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其表達(dá)缺失在卵巢癌惡性進(jìn)展中可能發(fā)揮推動(dòng)作用，Smad4陰性表達(dá)者預(yù)后不良。
　　2.上皮性卵巢癌組織中Cortactin mRNA及蛋白表達(dá)明顯高于卵巢良性腫瘤，Cortactin mRNA表達(dá)與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)及FIGO分期相關(guān)，而Cortactin蛋白表達(dá)僅與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)相關(guān)

10、。單因素生存分析顯示Cortactin陰性表達(dá)者具有顯著生存優(yōu)勢(shì)，多因素分析顯示Cortactin表達(dá)為獨(dú)立預(yù)后因素。說(shuō)明腫瘤細(xì)胞分化越差，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)活性越強(qiáng)，作為重要的細(xì)胞骨架蛋白，Cortactin表達(dá)上調(diào)與卵巢癌的不良預(yù)后密切相關(guān)。
　　3.上皮性卵巢癌組織中Smad4和Cortactin mRNA表達(dá)之間存在中度負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.541，P=0.005）;而Smad4和Cortactin蛋白表達(dá)之間呈高度線性負(fù)相關(guān)(r=