異病同證之肝陽化風證的蛋白質組學研究及PRX3在肝陽化風證的表達及意義.pdf

1、目的:通過研究腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病肝陽化風證（異病同證）患者及健康人外周血的蛋白質組學研究，并進行相關蛋白質驗證，以探討異病同證之肝陽化風證的分子本質內涵。 方法分別分離出腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病肝陽化風證各組患者及健康人外周血單個核細胞，采用二維凝膠電泳分離各組總蛋白質，獲得差異表達蛋白質，制備各組蛋白質組表達圖譜，PDQuest軟件分析，并通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（MALDI-TOF）和數據庫

2、對差異表達的蛋白質分析鑒定。選擇肝陽化風證有意義的蛋白進行驗證，采用逆轉錄.多聚酶鏈式反應（RT-PCR）法檢測正常組及肝陽化風證組PRX3基因表達水平。 結果 1.建立了腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病四病之肝陽化風證患者及健康人外周血單個核細胞蛋白質表達圖譜；腦梗塞肝陽化風證組與健康對照組比較有21個相同表達的蛋白質，17個差異蛋白表達，其中13個蛋白質較健康對照組表達下調，4個較健康對照組表達上調，腦出血肝陽化風證

3、組與健康對照組比較有22個相同表達的蛋白質，21個差異蛋白表達，其中18個蛋白質較健康對照組表達下調，3個較健康對照組表達上調，帕金森病肝陽化風證組與健康對照組比較有23個相同表達的蛋白質，20個差異蛋白表達，其中18個蛋白質較健康對照組表達下調，2個較健康對照組表達上調，頸椎病肝陽化風證組與健康對照比較有17個相同表達的蛋白質，15個差異蛋白表達，其中13個蛋白質較健康對照組表達下調，2個蛋白質較健康對照組表達上調，而四病的肝陽化風證

4、共有5個表達相同的蛋白質，且表達均較健康對照組表達下調。鑒定出的蛋白質根據涉及的功能進行分類：包括細胞骨架蛋白、代謝酶類、細胞信號轉導蛋白、抗氧化蛋白、血液蛋白等。 2.差異蛋白驗證結果：RT-PCR法證實PRX3在各組的表達水平與2-DE結果一致：與健康對照組表達比較，腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病四病的肝陽化風證PRX3表達量均明顯下調（p<0.05），而四病各組間PRX3表達無差異（p>0.05）。 結論

5、 1.初步建立了腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病肝陽化風證患者及健康人對照組的外周血單個核細胞蛋白質表達圖譜。 2.腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病四病的肝陽化風證（異病同證）患者具有相同及差異表達的蛋白質，提示異病同證既有證的共同的物質基礎（相同的蛋白質表達），又有疾病本身不同的特點（差異蛋白質表達）。 3.PRX3的RT-PCR驗證結果與2-DE結果一致，提示蛋白質組學檢測的準確性，可靠性。 4.異病同證之肝