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文檔簡介
1、目的:觀察腦出血肝陽化風證患者用鎮(zhèn)肝熄風湯對證治療與大定風珠非對證治療并與健康對照組比較外周血單個核細胞(PBMCs)雙向凝膠電泳圖譜及蛋白質表達的動態(tài)變化,從以方測證的角度探討腦出血肝陽化風證的蛋白質譜表達規(guī)律,尋找腦出血肝陽化風證的證效關系蛋白質,進一步闡釋腦出血肝陽化風證的本質內涵。 方法:選取腦出血肝陽化風證患者20例隨機分為兩組,分別予以鎮(zhèn)肝熄風湯對證治療及大定風珠非對證治療,健康對照組10例;抽取靜脈血10ml,用淋
2、巴細胞分離液分離PBMCs,抽提PBMCs中的蛋白,利用固相梯度雙向凝膠電泳技術建立正常組及腦出血肝陽化風證組、鎮(zhèn)肝熄風湯對證治療組、大定風珠非對證治療組的PBMCs蛋白雙向凝膠電泳圖譜,經(jīng)PDQuest8.0軟件分析,選取差異表達的蛋白質點,應用MALDI-TOF-MS質譜儀獲得肽質量指紋圖譜,用Mascot軟件搜索數(shù)據(jù)庫鑒定部分差異表達蛋白質。 結果:經(jīng)雙向凝膠電泳和圖像分析,篩選出22個差異表達蛋白質點。其中腦出血肝陽化風
3、證與健康對照組比較有20個差異表達蛋白質點,8個蛋白質點表達下調,7個蛋白質點表達上調,5個蛋白質點缺失;腦出血肝陽化風證經(jīng)鎮(zhèn)肝熄風湯對證治療后與健康對照組比較4個蛋白質點表達下調,5個蛋白質點表達上調,2個蛋白質點缺失,9個蛋白質點表達與健康人無明顯差異;腦出血肝陽化風證大定風珠非對證治療后與健康對照組比較12個蛋白質點表達下調,5個蛋白質點上調,3個蛋白質點表達與健康人無明顯差異。20個蛋白質點中共有8個得到鑒定,其中腦出血肝陽化風
4、證與健康對照組比較6個蛋白表達下調,1個蛋白表達上調,1個蛋白質缺失;腦出血肝陽化風證經(jīng)鎮(zhèn)肝熄風湯對證治療后與健康對照組比較2個蛋白表達下調,1個蛋白缺失,5個蛋白表達與健康人無明顯差異;腦出血肝陽化風證用大定風珠非對證治療后與健康對照組比較8個蛋白均表達下調。 結論: (1)初步建立了腦出血肝陽化風證(鎮(zhèn)肝熄風湯對證治療)方證效應關系的外周血單個核細胞蛋白質雙向凝膠電泳圖譜。 (2)初步鑒定了腦出血肝陽化風證對
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