補(bǔ)中益氣湯對(duì)大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激反應(yīng)中ACTH和IL-2、IL-6調(diào)理作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：大鼠重度創(chuàng)傷刺激后，觀察大鼠的創(chuàng)傷應(yīng)激反應(yīng)情況和創(chuàng)傷應(yīng)激對(duì)大鼠神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫方面的影響；并通過(guò)補(bǔ)中益氣湯對(duì)創(chuàng)傷大鼠治療調(diào)理后，觀察比較其體內(nèi)ACTH和IL-2、IL-6含量的變化，闡述補(bǔ)中益氣湯對(duì)創(chuàng)傷大鼠應(yīng)激激素、細(xì)胞因子的作用機(jī)理，總結(jié)補(bǔ)中益氣湯調(diào)理應(yīng)激反應(yīng)的細(xì)胞分子機(jī)制，用中醫(yī)方法為調(diào)控應(yīng)激反應(yīng)探索新的思路，為臨床上進(jìn)一步合理應(yīng)用補(bǔ)益類中藥治療調(diào)理應(yīng)激反應(yīng)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：健康清潔SD大鼠45只，月齡為

2、1.5-2月，體重180-220g，雌雄各半，據(jù)隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為A、B、C三組，其中A組（n=15）為空白對(duì)照組、B組（n=15）為模型對(duì)照組、C組（n=15）為藥物治療組。將B、C組大鼠，清醒狀態(tài)下造模，將大鼠背位固定于木板后，左下肢股骨中段位置放置一醫(yī)用長(zhǎng)金屬鑷子,從柄部算起,大約將1/4部放置于大鼠大腿處（股骨中段位置）,以近20 cm高度自由垂直落下500g重法碼，砸擊鑷子,借助間接力的作用制成左下肢股骨閉合性骨折。大鼠有骨折

3、的典型表現(xiàn)，包括大鼠左下肢大腿處畸形腫脹，手摸有明確骨摩擦感，失去雙下肢運(yùn)動(dòng)和支撐功能。造模后1h開始分別給A組、B組經(jīng)胃灌注生理鹽水，給C組經(jīng)胃灌注補(bǔ)中益氣湯，每次灌胃藥量約為0.5ml，早晚各一次。于造模后第6h、1d、3d、5d、7d、10d經(jīng)眼內(nèi)眥靜脈或股靜脈抽取大鼠體內(nèi)靜脈血，高速離心沉淀后留取血漿，冰箱4℃低溫保存，用ELISA法檢測(cè)記錄各組大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激后體內(nèi)促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）和白細(xì)胞介素2（IL-2）、白細(xì)胞介素

4、6（IL-6）的含量，觀察大鼠在遭受重度創(chuàng)傷后經(jīng)過(guò)補(bǔ)中益氣湯的治療調(diào)理，應(yīng)激反應(yīng)的一般情況和應(yīng)激激素和細(xì)胞因子的水平變化，并與正常組和模型組進(jìn)行比較對(duì)照。
　　結(jié)果：實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠體重比較：A組和C組實(shí)驗(yàn)?zāi)┡c實(shí)驗(yàn)前大鼠體重比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而 B組大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)┡c實(shí)驗(yàn)前體重差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　不同時(shí)間點(diǎn)3組大鼠ACTH水平的變化結(jié)果：A組ACTH在傷后6h、1d、3d、5d、7d、1

5、0d時(shí)與實(shí)驗(yàn)前相比略有升高，但各時(shí)間點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)前差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；B組ACTH表現(xiàn)為傷后應(yīng)激一開始即顯著升高，并且在傷后6h、1d、3d連續(xù)長(zhǎng)時(shí)間維持在高水平（P＜0.01），在傷后5d、7d、10呈逐漸下降趨勢(shì)，但仍高于與A組同時(shí)間點(diǎn)的含量（P＜0.05）；C組在經(jīng)過(guò)應(yīng)用補(bǔ)中益氣湯干預(yù)調(diào)理后ACTH含量的增幅明顯得到抑制，各時(shí)間點(diǎn) ACTH含量均低于 B組（P＜0.05），尤其在傷后5d、7d、10d的ACTH含量降低

6、到正常組水平，與A組同時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　不同時(shí)間點(diǎn)3組大鼠IL-2、IL-6含量均數(shù)比較結(jié)果：A組IL-2、IL-6在傷后在各時(shí)間點(diǎn)呈略微增高，但與實(shí)驗(yàn)前比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（aP＞0.05）。B組IL-2在創(chuàng)傷6h就降為最低，且回升緩慢；IL-6在傷后增幅顯著，但在峰值表現(xiàn)在第1d、3d，在傷后第5d、7d、10d逐漸降低（aP＜0.01或 aP＜0.05）。（bP＜0.01）。C組經(jīng)過(guò)補(bǔ)中益氣

7、湯調(diào)理后，對(duì)IL-2的降低和IL-6的升高均有顯著控制作用，尤其表現(xiàn)為對(duì)IL-2的降低和IL-6升高的雙向削峰作用，使之不至太過(guò)，與B組同時(shí)間點(diǎn)比較差異有顯著性（bP＜0.01, cP＜0.05)，在傷后第10d，IL-2和IL-6幾乎恢復(fù)至正常，與A組對(duì)照無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（dP＞0.05）
　　結(jié)論：補(bǔ)中益氣湯能在細(xì)胞分子水平有效調(diào)理創(chuàng)傷大鼠應(yīng)激反應(yīng)發(fā)生發(fā)展的整個(gè)過(guò)程，顯著影響其體內(nèi)應(yīng)激激素和細(xì)胞因子的含量，改善創(chuàng)傷后大鼠的一般生存