EZH2基因調(diào)控腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文EZH2基因調(diào)控腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的實(shí)驗(yàn)研究姓名：黃偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（神經(jīng)外科）指導(dǎo)教師：盧亦成孫克華20100501第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文目的：研究EZH2基兇在腦膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中表達(dá)水平。方法：根據(jù)EZH2的eDNA序列設(shè)計(jì)相應(yīng)引物，收集37例不同級(jí)別腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤和8例正常腦組織，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測EZH2mRNA在上述組織標(biāo)本中的相對(duì)表達(dá)水平，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染

2、色檢貝IJEZH2在53侈1J腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織和8例正常腦組織中的蛋白表達(dá)水平，并利用Spearman相關(guān)分析檢驗(yàn)EZH2蛋白與增殖抗原Ki67表達(dá)的相關(guān)性。最后應(yīng)用免疫熒光／激光共聚焦技術(shù)獲取EZH2蛋白的細(xì)胞定位信息。結(jié)果：37例腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤和8例正常腦組織實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果提示EZH2mRNA表達(dá)水平在星形膠質(zhì)瘤組織中明顯上調(diào)，與正常腦組織相比差別顯著(17696412269VS1004143；p=0000)。并且，E

3、ZH2mRNA水平在高級(jí)別膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)水平明顯高于低級(jí)別膠質(zhì)瘤，二者相比差異顯著(2483347625vs28272969：p=0000)。相似地，免疫組織化學(xué)染色提示EZH2蛋白在星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織中表達(dá)明顯上調(diào)，與正常腦組織相比差別顯著(12104845％vsO0400％：P0000)，且高、低級(jí)別膠質(zhì)瘤之間差別顯著(16674689％VS3914298％：P=0000)，EZH2陽性細(xì)胞染色率與增殖抗原Ki67蛋白表達(dá)呈明顯

4、的正相關(guān)關(guān)系(Spearmanr=067，P0001)。免疫熒光／激光共聚焦提示EZH2蛋白定位于膠質(zhì)瘤細(xì)胞核膜。結(jié)論：EZH2表達(dá)于被檢測的星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤和正常腦組織中，但其在星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織中的mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯高于正常腦組織，并和膠質(zhì)瘤病理級(jí)別以及增殖抗原Ki67表達(dá)呈正相關(guān)性，提示EZH2可能在星形膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展惡變過程中具有重要作用。關(guān)鍵詞：mRNA，星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤，病理級(jí)別第二部分EZH2在U251，U87MG膠