細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)哮喘模型大鼠氣道平滑肌細(xì)胞中RANTES、eotaxin、TGF-β1表達(dá)的調(diào)控.pdf

1、目的：氣道慢性炎癥和氣道重塑是支氣管哮喘（簡稱哮喘）的重要特征，與氣道平滑肌的功能狀況密切相關(guān)。最新研究發(fā)現(xiàn)，氣道平滑肌細(xì)胞（airway smooth muscle cell，ASMCs）除收縮、增殖和遷移特性外，還具有重要的免疫調(diào)節(jié)功能。ASMCs能以自分泌和旁分泌的方式產(chǎn)生多種細(xì)胞因子、趨化因子、生長因子、細(xì)胞粘附分子及大量細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM），在啟動(dòng)和維持哮喘氣道炎癥和氣道重塑中起著重要

2、作用。對(duì)ASMCs免疫功能的新認(rèn)識(shí)，使探討哮喘ASMCs免疫功能調(diào)控的細(xì)胞分子機(jī)制成為哮喘發(fā)病機(jī)制研究新的熱點(diǎn)和哮喘治療新的靶點(diǎn)。 體外研究表明，IL-1β、TNFα等炎癥因子可誘導(dǎo)非哮喘ASMCs能分泌多種免疫調(diào)節(jié)因子，如細(xì)胞因子、趨化因子、生長因子、細(xì)胞粘附分子及大量細(xì)胞外基質(zhì)。這些免疫調(diào)節(jié)因子可調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞增殖和免疫球蛋白分泌、促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞的募集和生存、反過來促進(jìn)ASMCs自身的增殖和分化，在啟

3、動(dòng)和維持哮喘氣道炎癥和氣道重塑中起著重要作用。但是，目前國內(nèi)外對(duì)調(diào)控哮喘ASMCs免疫功能的細(xì)胞分子機(jī)制尚不清楚。 氣道平滑肌及細(xì)胞外基質(zhì)作為氣道壁維持氣道結(jié)構(gòu)和功能的重要組成成分，二者間的相互作用在哮喘氣道炎癥和氣道重塑中起著重要作用。在哮喘病理發(fā)展過程中不僅有ASMCs數(shù)量的增加和功能的改變，而且還有ECM量和組成的改變。在哮喘氣道ECM各組分中，纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)、I型膠原(type I coll

4、agen，COL-1)、層粘蛋白(laminin，LA)顯著增加。ECM能調(diào)控ASMCs的生存、增殖和遷移等生物學(xué)行為。但目前國內(nèi)外尚未有ECM對(duì)哮喘ASMCs免疫功能的調(diào)控作用及調(diào)控機(jī)制的報(bào)道。調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌細(xì)胞因子（regulated on activated normal T expressed and secreted，RANTES）、嗜酸性粒細(xì)胞特異性趨化因子（eotaxin）、轉(zhuǎn)化生長因子β1（transfor

5、ming growth factorβ1，TGF-β1）參與哮喘氣道炎癥和氣道重塑。因此本實(shí)驗(yàn)擬探討ECM對(duì)哮喘模型大鼠氣道平滑肌細(xì)胞中RANTES、eotaxin、TGF-β1表達(dá)的調(diào)控作用。 方法：wistar雄性大鼠隨機(jī)分為哮喘組（8只）和正常對(duì)照組（8只）。通過卵清蛋白(OVA)致敏后，OVA激發(fā)的方法建立哮喘模型。將培養(yǎng)的大鼠氣道平滑肌細(xì)胞分別種植于涂覆有FN、LA、COL-1的培養(yǎng)瓶中。實(shí)時(shí)定量PCR和Western

6、-blot法檢測(cè)ASMCs中RANTES、eotaxin、TGF-β1 mRNA和蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：實(shí)時(shí)定量PCR和Western-blot法的結(jié)果都表明，RANTES、eotaxin、TGF-β1這三種因子的表達(dá)，哮喘空白組的表達(dá)相對(duì)于正常對(duì)照空白組表達(dá)升高，升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；哮喘組內(nèi)，用ECM干預(yù)的表達(dá)顯著高于空白組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；在正常對(duì)照組內(nèi)，各組間表達(dá)無差異性（p>0.05）。