左卡尼汀對(duì)1型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的研究.pdf

1、左卡尼汀對(duì)1型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的研究捅要目的通過建立1型糖尿病大鼠模型，并采用灌胃方式給予不同劑量的左卡尼汀口服液，觀察左卡尼汀對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞是否具有保護(hù)作用。方法選取成年雄性Wistar大鼠30只，體重在240一3009之間，隨機(jī)分為四組，正常對(duì)照組6只，低劑量藥物治療組8只，高劑量藥物治療組8只，糖尿病模型組8只。實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)條件下，所有大鼠放于鐵籠正常喂養(yǎng)2周后，藥物治療組和糖尿病模型組給以57mg／kg腹腔注射鏈

2、脲佐菌素(STZ)，48小時(shí)后抽靜脈血測血糖，血糖值為167mmol／l以上的大鼠納入糖尿病模型。建模后給以低劑量藥物治療組大鼠左卡尼汀口服液90mg／kg灌胃，1次／d；給以高劑量藥物治療組大鼠左卡尼汀口服液200mg／kg灌胃，1次／d；給以糖尿病模型組和正常對(duì)照組大鼠同等劑量的O9％生理鹽水灌胃，1次／d；每周測一次體重及血糖，4周后處死大鼠，取左眼視網(wǎng)膜行電鏡檢查，右眼行免疫組織化學(xué)染色觀察核轉(zhuǎn)錄因子NF—E2相關(guān)因子(Nrf2

3、)及過氧化氫酶(CAT)在視網(wǎng)膜組織中的表達(dá)，行脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)缺口末端標(biāo)記(TUNEL)染色，檢測糖尿病視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：低劑量藥物治療組及高劑量藥物治療組顯著上調(diào)了Nrf_2及CAT的表達(dá)，與糖尿病模型組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F94125，49841；P0，05，P(005)；藥物治療組與糖尿病模型組相比，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡數(shù)目顯著減少，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(廬126561

4、，P005)。結(jié)論STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病視網(wǎng)膜病變動(dòng)物模型建立成功；左卡尼汀El服液對(duì)1型糖尿病視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞具有～定的保護(hù)作用，且可通過Nrf2／ARE通路的抗氧化應(yīng)激及抗凋亡機(jī)制減少糖尿病視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。碩士研究生時(shí)肖(眼科學(xué))指導(dǎo)教師孔慶蘭教授關(guān)鍵詞：左卡尼?。惶悄虿∫暰W(wǎng)膜病變；凋亡；視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞；大鼠目錄引言1第一章實(shí)驗(yàn)材料與方法311實(shí)驗(yàn)動(dòng)物312主要實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)試劑、藥物3121主要實(shí)驗(yàn)儀器和器械3122主要實(shí)驗(yàn)

5、試劑和藥物3l，3主要實(shí)驗(yàn)試劑的配制414實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⑴c分組4141實(shí)驗(yàn)分組4142模型的建立4143大鼠灌胃給藥415實(shí)驗(yàn)方法4151常規(guī)石蠟包埋5I52免疫組織化學(xué)檢測轉(zhuǎn)錄因子NF—E2相關(guān)因子(Nrf2)在視網(wǎng)膜的表達(dá)51，5。3免疫組織化學(xué)檢測過氧化氫酶(CAT)在視網(wǎng)膜的表達(dá)6l。54TUNEL染色觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡6155視網(wǎng)膜電鏡標(biāo)本制備方法716結(jié)果分析方法817統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法8第二章實(shí)驗(yàn)結(jié)果921血糖測定結(jié)果92