基因芯片技術(shù)篩選骨肉瘤發(fā)病、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文基因芯片技術(shù)篩選骨肉瘤發(fā)病、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的研究姓名：章浩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（骨外科學(xué)）指導(dǎo)教師：紀(jì)方蔡鄭東20100501第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文骨肉瘤細(xì)胞株U20S、MG一63與成骨細(xì)胞株hFOBl191為研究對(duì)象。通過細(xì)胞培養(yǎng)、RNA抽提、RTPCR、轉(zhuǎn)染、westernblot檢測(cè)、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)、凋亡分析等一系列實(shí)驗(yàn)方法，首先證實(shí)PAK3mRNA及蛋白在骨肉瘤細(xì)胞株中高表達(dá)，并驗(yàn)證基因

2、芯片數(shù)據(jù)的可靠性。繼而通過siRNA干擾的方法下調(diào)PAK3在骨肉瘤細(xì)胞株中表達(dá)，并采用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)、凋亡分析等方法觀察敲除PAK3對(duì)骨肉瘤細(xì)胞株的影響。實(shí)驗(yàn)中采用Studentt檢驗(yàn)比較不同組之間的差異，P005時(shí)具有顯著性差異。結(jié)果：1、PAK3mRNA及蛋白在骨肉瘤細(xì)胞株中高表達(dá)。2、轉(zhuǎn)染PAK3siRNA的骨肉瘤細(xì)胞株U。20S細(xì)胞凋亡百分比增加，腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速度受到抑制。3、骨肉瘤細(xì)胞株U20S中敲除PAK3可以抑制了