骨肉瘤發(fā)病相關(guān)基因的初篩.pdf

1、目的:
　　篩選和鑒定骨肉瘤發(fā)病相關(guān)的基因，揭示骨肉瘤發(fā)病的分子機(jī)制。
　　方法:
　　收集3例手術(shù)切除骨肉瘤新鮮組織標(biāo)本，及患者正常血清作為對照，提取組織總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄及標(biāo)記，再與Affymetrix基因芯片雜交，采用經(jīng)驗(yàn)貝葉斯法篩選出骨肉瘤發(fā)病的差異表達(dá)基因；經(jīng)對差異表達(dá)基因進(jìn)行Gene ontology注釋并對其分子功能、生物學(xué)途徑及信號通路富集分析，從中選擇3個基因；最后用RT-PCR和Western bl

2、ot驗(yàn)證部分基因的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　基因芯片篩選到105個骨肉瘤發(fā)病的差異表達(dá)基因，其中在骨肉瘤中表達(dá)上調(diào)的42個，下調(diào)的63個；骨肉瘤發(fā)病的差異表達(dá)基因主要分子功能為蛋白質(zhì)結(jié)合等。分布的生物學(xué)途徑為免疫應(yīng)答、補(bǔ)體活化及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等。主要參與的信號通路為免疫應(yīng)答、細(xì)胞活力、細(xì)胞運(yùn)動及負(fù)調(diào)控細(xì)胞凋亡等；RT-PCR和Western blot驗(yàn)證BAX、HMMR和SHB基因的表達(dá)，結(jié)果與芯片結(jié)果相符。
　　結(jié)論: