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1、對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)的主要病毒病原之一。它是一種具有囊膜的、無(wú)包涵體的、類(lèi)桿狀雙鏈環(huán)狀DNA病毒,具有傳染力強(qiáng),致死率高,難防治的特點(diǎn)。由于其宿主范圍廣泛,能夠侵染多種甲殼綱動(dòng)物,對(duì)養(yǎng)殖業(yè)和海洋環(huán)境都構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。 本論文主要針對(duì)病毒結(jié)構(gòu)蛋白開(kāi)展研究。這有利于揭示病毒復(fù)制過(guò)程中的組裝機(jī)制,從而為最終建立有效的防治方法提供有力的科學(xué)依據(jù)。研究工作主
2、要分為兩部分:(1)膜蛋白VP33的鑒定。之前的研究通過(guò)對(duì)完整病毒的結(jié)構(gòu)蛋白進(jìn)行SDS—PAGE電泳和質(zhì)譜鑒定后,結(jié)合氨基酸序列比對(duì)分析,已確定VP33為WSSV基因組中ORF wsv254編碼的膜蛋白。本文分別在E.coli XL1—Blue和E. coliBL21(DE3)中表達(dá)純化了帶6×His和GST表達(dá)標(biāo)簽的重組VP33蛋白,并收集純化所得的融合蛋白((His)6—VP33)復(fù)性后注射小鼠獲得特異性多克隆抗體。之后,利用GST
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