結(jié)核桿菌培養(yǎng)濾液蛋白對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠氣道IFN-γ和IL-5表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景：
　　 變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis,AR)和支氣管哮喘(bronchial asthma,BA)是上、下氣道常見(jiàn)的變應(yīng)性疾病，其發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)，嚴(yán)重影響人類(lèi)的生活質(zhì)量。研究表明變應(yīng)性鼻炎和支氣管哮喘常同時(shí)存在。哮喘患者常伴有鼻炎，而鼻炎患者更易出現(xiàn)哮喘。大約38％的變應(yīng)性鼻炎患者并發(fā)哮喘，而大概80％的哮喘患者有慢性鼻部癥狀。現(xiàn)在“一種氣道，一種疾病”的觀點(diǎn)已被廣泛接受?！罢闲詺獾兰膊　?、

2、“慢性變應(yīng)性氣道炎癥綜合征”等概念形象地體現(xiàn)了這種一致性和相關(guān)性。2001年世界衛(wèi)生組織出版的《變應(yīng)性鼻炎及其對(duì)哮喘的影響》（ARIA），在論述了變應(yīng)性鼻炎的同時(shí)，專(zhuān)門(mén)指出了對(duì)伴發(fā)哮喘的影響。
　　 目前，變應(yīng)性氣道炎癥的治療方法主要有：避免接觸變應(yīng)原、藥物治療和免疫治療等。避免接觸變應(yīng)原難以做到，藥物治療只是改善癥狀，而免疫治療從疾病發(fā)生的始動(dòng)環(huán)節(jié)進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)，是世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦使用的唯一對(duì)因治療手段。結(jié)核分枝桿菌培

3、養(yǎng)濾液蛋白(Culture filtrate protein，CFP) 是結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)上清中的蛋白混合物,能刺激T細(xì)胞高效分泌IFN-γ,目前主要用于結(jié)核的診斷方面。
　　 本研究以卵蛋白為致敏原建立變應(yīng)性鼻炎大鼠模型，觀察上、下氣道的炎癥反應(yīng)及IFN-γ和IL-5表達(dá)的改變。同時(shí)CFP經(jīng)鼻腔給藥干預(yù)，觀察CFP對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠上、下氣道炎癥反應(yīng)及IFN-γ和IL-5表達(dá)的影響，為CFP作為一種免疫調(diào)節(jié)劑治療變應(yīng)性氣道炎癥提

4、供試驗(yàn)依據(jù)。
　　 第一部分：
　　 目的：
　　 通過(guò)對(duì)大鼠變應(yīng)性鼻炎模型上、下氣道炎癥反應(yīng)的研究，探討上、下氣道炎癥反應(yīng)的相關(guān)性。
　　 方法：
　　 雄性SD(SPF級(jí))大鼠隨機(jī)分為2組：正常對(duì)照組、模型組，每組10只。以卵蛋白為致敏原建立大鼠變應(yīng)性鼻炎模型。HE染色觀察鼻和肺組織的病理學(xué)改變；免疫組化檢測(cè)鼻和肺組織中IL-5和IFN-γ的表達(dá)；以酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linke

5、d immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液(bronchial alveolus lavage fluid，BALF)中IL-5和IFN-γ的水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.變應(yīng)性鼻炎大鼠模型組鼻和肺組織有明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　 2.模型組鼻和肺組織IL-5的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，并且和嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量呈正相關(guān)。模型組鼻和肺組織IFN-γ的表達(dá)低于對(duì)照組。
　　 3.模

6、型組BALF中IL-5的含量高于對(duì)照組，而IFN-γ的含量低于對(duì)照組.
　　 結(jié)論：
　　 變應(yīng)性鼻炎大鼠上、下氣道存在Th1和Th2的失衡、Th2優(yōu)勢(shì)表達(dá)；上、下氣道炎癥反應(yīng)具有一致性和相關(guān)性。
　　 第二部分：
　　 目的：
　　 觀察結(jié)核桿菌培養(yǎng)濾液蛋白(Mycobacterium tuberculosis culture filtrate protein，CFP) 對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠氣道炎癥

7、反應(yīng)及IFN-γ和IL-5表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 雄性SD(SPF級(jí))大鼠隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、模型組、CFP治療組、布地奈德治療組、CFP對(duì)照組，每組10只。以卵蛋白為致敏原建立變應(yīng)性鼻炎大鼠模型，CFP經(jīng)鼻腔給藥干預(yù)，觀察大鼠鼻塞、打噴嚏、抓鼻等鼻部癥狀，HE染色觀察鼻粘膜、肺組織的病理學(xué)改變；免疫組化檢測(cè)鼻粘膜、肺組織中白細(xì)胞介素5(interleukin-5，IL-5)和干擾素γ（IFN-γ）的表達(dá)

8、水平；以酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linked immuno-sorbent assay，ELISA)檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液(bronchial alveolus lavage fluid，BALF)中IL-5、IFN-γ的水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.大鼠變應(yīng)性鼻炎模型成功建立；
　　 2.CFP可明顯改善變應(yīng)性鼻炎的鼻部癥狀，減輕鼻粘膜、肺組織的炎癥反應(yīng)，使Th1類(lèi)細(xì)胞因子IFN-γ水平升高，Th