SARS股骨頭缺血性壞死的病因研究.pdf

1、目的 探討SARS患者康復(fù)期股骨頭缺血性壞死的影響因素，以及判斷SARS冠狀病毒是否通過S蛋白介導引起股骨頭壞死。 方法 第一部份：臨床研究 1.對廣州醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院SARS康復(fù)患者92例隨訪康復(fù)患者1年，以mR檢測雙髖關(guān)節(jié)，從中發(fā)現(xiàn)股骨頭缺血性壞死患者。 3.把SARS康復(fù)患者分組。病例組為所有股骨頭缺血壞死患者，對照組為其余無股骨頭缺血性壞死患者。 4.記錄兩組患者性別、年齡、激素

2、總量，激素應(yīng)用天數(shù)，激素單日最大劑量，是否有沖擊療法等資料。 5.將數(shù)據(jù)錄入，應(yīng)用統(tǒng)計學分析，統(tǒng)計患者激素使用基本情況。 6.以SPSS13.0統(tǒng)計分析病例組及對照組各變量RR值并以logistic回歸多因素分析進行統(tǒng)計分析，研究SARS股骨頭壞死的危險因素。 第二部份：實驗研究 1.取5個正常的股骨頭和肺組織，組織切片檢測。 2.取5個正常股骨頭負重區(qū)軟骨下松質(zhì)骨、軟骨，5個正常肺組織70-10

3、0g；.用RNA提取液Trizol經(jīng)過均質(zhì)化，相分離，沉淀，清洗，重溶等方法提取總RNA。 3.合成ACE2的RT-nest-PCR的二對引物及看家基因Humanβactingene引物。 4.以SuperScriptIMⅢRT試劑盒進行逆轉(zhuǎn)錄合成CDNA。 5.合成的CDNA以ACE2mRNA的二對引物行PCR反應(yīng)及擴增。 6.PCR產(chǎn)物的電泳分析。 7.合成的CDNA以Humanβacting

4、ene引物行PCR反應(yīng)及擴增，PCR產(chǎn)物的電泳分析。 結(jié)果 第一部份： 1.在治療期間，92例患者中有25例未應(yīng)用激素，67例使用不同劑量的激素，隨訪1年以上，有6(6.5％)例出現(xiàn)股骨頭缺血性壞死，其中未使用激素的患者中無股骨頭壞死病例，6例股骨頭壞死均出現(xiàn)于激素使用者中(占8.8％)。 2.全部SARS患者全療程使用的糖皮素總量平均為(1479.9±188.3)mg，應(yīng)用天數(shù)平均為(11.4±1.0)

5、d，單日激素最大用量平均為(123.1±13.7)mg。 3.6例股骨頭壞死均為重癥SARS患者，激素使用總量分為：950mg、1950mg、3400mg、6100mg、7300mg、8900mg,平均為(3100±3568.6)mg；它們在距激素使用后220天陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)有股骨頭壞死，其MRI改變包括骨髓水腫，缺血壞死，關(guān)節(jié)積液等。 4.引用逐步Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn)，股骨壞死與激素總用量有關(guān)，與年齡、性別、激

6、素應(yīng)用天數(shù)，有無沖擊療法，單日最大用量等因素無關(guān)。 第二部份： 1.取樣的股骨頭及肺組織，組織切片顯示為正常組織。 2.正常人肺組織、股骨頭負重區(qū)軟骨下松質(zhì)骨、軟骨中均有Humanβactingene的mRNA有效表達。 3.正常人肺組織有ACE2信使RNA的有效表達，但股骨頭負壓區(qū)軟骨下松質(zhì)骨、軟骨沒有ACE2信使RNA的有效表達。 結(jié)論 1.SARS患者康復(fù)期股骨頭缺血性壞死主要與治療