結(jié)核病家兔皮膚病理模型與免疫病理機(jī)制研究.pdf

1、第一部分：分枝桿菌所致家兔皮膚液化病理模型研究 研究目的:皮內(nèi)接種免疫建立BCG、H37Ra和恥垢分枝桿菌感染的新西蘭兔皮膚模型，為肺結(jié)核干酪樣壞死和繼而發(fā)生的液化提供研究模型。 材料和方法:將三種菌株卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin，BCG)，恥垢分枝桿菌(M.smegmatis)，H37Ra株配置成5×106CFU、5×104CFU、5×102CFU菌液。對(duì)健康新西蘭兔初次免疫分別行皮內(nèi)注射5

2、×106CFU、5×104CFU、5×102CFU的BCG、H37Ra和恥垢分枝桿菌菌液。6周后在病灶周圍再次以相同劑量行皮內(nèi)注射進(jìn)行加強(qiáng)免疫，加強(qiáng)免疫后14天后病變明顯時(shí)取材，以石蠟包埋，制作切片并行HE染色于鏡下觀察。 結(jié)果:新西蘭兔分別經(jīng)皮內(nèi)接種BCG、H37Ra和恥垢分枝桿菌后，高劑量組觀察到明顯的炎癥反應(yīng)和膿腫液化、破潰等病理改變。再次免疫后可觀察到Koch現(xiàn)象。引起病變的嚴(yán)重程度依次為BCG強(qiáng)于H37Ra，后者又強(qiáng)于

3、恥垢分枝桿菌。皮膚模型處取材行細(xì)菌抗酸染色，結(jié)果呈陽性。三組病灶切片的顯微病理改變均可觀察到典型的結(jié)核結(jié)節(jié)樣病灶。BCG中、低劑量組再次免疫后可誘導(dǎo)產(chǎn)生小結(jié)節(jié)樣改變，但不發(fā)生液化潰瘍，H37Ra中劑量組和恥垢分枝桿菌中劑量組及所有低劑量組均沒有觀察到明顯的病理改變。 結(jié)論:分枝桿菌引起的皮膚干酪樣壞死和液化與感染細(xì)菌劑量密切相關(guān)，5X106CFU/ml濃度的分枝桿菌可有效誘導(dǎo)新西蘭兔皮膚病灶發(fā)生液化和壞死，其中BCG引起的病理改

4、變最明顯。 第二部分：人空洞型肺結(jié)核病理組織CD4、CD8、CD25和CD68分子表達(dá)分析 研究目的:應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)慢性纖維空洞型肺結(jié)核病人肺病理組織中CD4+T、CD8+T、CD25+T淋巴細(xì)胞和CD68+巨噬細(xì)胞的增殖情況及分布特點(diǎn)，探究肺結(jié)核發(fā)生發(fā)展的免疫機(jī)制。 材料和方法:蘭州市肺科醫(yī)院2005至2006年肺結(jié)核病人手術(shù)標(biāo)本中選取的10例石蠟標(biāo)本。應(yīng)用免疫組織化學(xué)兩步法檢測(cè)10例空洞性肺結(jié)核干酪