人和鼠era基因的功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Era蛋白的N端是一個典型的鳥苷酸結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)域,與其它G蛋白有較高的同源性;C端含有一個RNA結(jié)合功能結(jié)構(gòu)域—KH結(jié)構(gòu)域.研究這種從細(xì)菌到人類高度保守的新G蛋白家族成員對于探索自然并發(fā)現(xiàn)規(guī)律具有重要意義.作者的研究工作可以分為兩個部分.1、利用酵母雙雜交釣取人Era蛋白的結(jié)合蛋白.2、利用RNAi技術(shù)封閉人和鼠era基因在相應(yīng)細(xì)胞中的表達(dá),觀察細(xì)胞發(fā)生的變化. 首先我們以hEra蛋白作為誘餌蛋白,從人era基因表達(dá)較高的胎肝cDNA文

2、庫中,篩選得到了15個候選作用蛋白.結(jié)果表明,hEra蛋白在GTP存在情況下可以和NTR/C345C domain結(jié)合.hEra蛋白和NTR/C345C domain相互作用的初步結(jié)果為我們進(jìn)一步研究提供了方向和線索.另外我們還利用自行構(gòu)建的專門用于RNAi的shRNA表達(dá)載體,在相應(yīng)細(xì)胞內(nèi)降低了人和鼠era基因的表達(dá).細(xì)胞生長曲線結(jié)果表明,人和鼠era基因的表達(dá)下調(diào),可以引起"S"形生長曲線右移;透射電鏡結(jié)果也顯示,人和鼠era基因的

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