HTR6-mTOR信號(hào)通路在癲癇發(fā)生中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:了解HTR6與mTOR在癲癇患者和氯化鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型腦組織中的表達(dá)，探討兩者間的關(guān)系以及在癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 方法:選擇成年雄性SD大鼠，經(jīng)腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品構(gòu)建癲癇動(dòng)物模型。采用wes tern blot、免疫組化、免疫熒光法測(cè)定HTR6在氯化鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型（包括癲癇發(fā)作后不同時(shí)間點(diǎn):1d、3d、7d、14d、30d）腦組織中的表達(dá);應(yīng)用Western b lot測(cè)定氯化鋰-匹羅卡品癲

2、癇大鼠模型(癲癇發(fā)作后1d、3d、7d)中mTOR活性變化，以磷酸化S6蛋白p-S6/總S6蛋白的比值反映mTOR活性。并應(yīng)用HTR6特異性拮抗劑SB-399885進(jìn)行干預(yù)研究，觀察其對(duì)大鼠行為學(xué)及mTOR活化的影響，采用膜片鉗技術(shù)記錄大鼠神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢?actionpotential, AP)的變化。同時(shí)，從課題組已建立的癲癇腦庫(kù)中隨機(jī)抽取26例癲癇患者腦組織作為實(shí)驗(yàn)組，12例腦外傷致顱內(nèi)高壓行手術(shù)減壓治療的患者腦組織作為對(duì)照組，用相

3、同的方法檢測(cè)HTR6與mTOR的表達(dá)，了解其與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:HTR6在癲癇患者和氯化鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型腦組織中均表達(dá)上調(diào)(P＜0.05); HTR6在氯化鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型中主要在神經(jīng)元中表達(dá)，癲癇發(fā)作后3d顯著增加，到30d時(shí)仍維持較高的水平(P＜0.05); mTOR在氯化鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型中異?；罨?，其活性在癲癇發(fā)作后3d顯著增加，到7d時(shí)仍維持在較高的水平(P＜0.05)。HTR6特異