攜帶NK4與IL-2基因的減毒沙氏菌抗腫瘤效應(yīng)的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：構(gòu)建攜帶NK4基因和IL-2基因真核表達載體的減毒沙門氏菌株，觀察其在小鼠體內(nèi)是否能夠誘導有效的抗腫瘤免疫反應(yīng)。 方法：用基因工程方法將NK4基因和IL-2基因克隆入真核表達載體pcDNA4，并進行基因測序。重組質(zhì)粒經(jīng)鑒定后再電轉(zhuǎn)入減毒沙門氏菌Ty21a中，通過PCR和酶切鑒定，并對構(gòu)建的重組減毒沙門氏菌進行體外穩(wěn)定性觀察。將已鑒定的重組菌pcDNA4-NK4/Ty21a、pcDNA4-IL-2/Ty21a口服免疫小鼠。體

2、外流式細胞儀檢測CD44+T細胞、CDS+T細胞及IgM、IgG1、IgA水平。MTT法檢測脾臟組織中B、T淋巴細胞增殖水平。HEPG2肝癌細胞接種BALB/c小鼠，檢測各組小鼠腫瘤生長情況。PCR方法檢測目的基因在小鼠體內(nèi)的整合和表達情況。 結(jié)果：經(jīng)PCR和酶切證實，構(gòu)建了分別含NK4基因和IL-2基因的重組真核表達質(zhì)粒pcDNA4-NK4和pcDNA4-IL-2，并將他們成功導入減毒沙門氏菌Ty21a中。穩(wěn)定性實驗結(jié)果表明該

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