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文檔簡介
1、目的:克隆并鑒定人的CD158基因,通過基因轉染的方法在淋巴細胞上獲得表達,采用混合淋巴細胞培養(yǎng)的方法來初步研究其對細胞生物學活性的改變.結論:1.測序表明該實驗已成功克隆了人的CD158全長cDNA.改進的快速鑒定RNA電泳的方法簡單、有效.建立了一種釣取低豐度表達基因CD158的方法.2.流式細胞儀測定CD158b表達率的結果,一方面顯示逆轉錄病毒表達載體pMSCVneo轉染效率較高,可以用于目的基因的轉移.另一方面也表明CD158
2、b在淋巴細胞上獲得了高效表達.3.MTT混合淋巴細胞殺傷實驗結果表明轉染了受者CD158b基因的供者淋巴細胞對受者淋巴細胞的殺傷活性大大降低了,而空載體及未轉染組供者淋巴細胞對受者淋巴細胞的殺傷活性無明顯變化.說明CD158b基因不僅獲得了表達,而且使淋巴細胞的生物學活性發(fā)生了改變.或者說CD158b與相應配體結合后能夠下調殺傷細胞的殺傷活性,誘導了免疫耐受.4.對個體化的過繼免疫治療和防治GVHD有指導意義.在了解受者KIR(主要是C
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