丹參毛狀根基因誘導(dǎo)表達(dá)分析及其有效成分生物合成基因的克隆研究.pdf

1、本文對丹參毛狀根基因誘導(dǎo)表達(dá)分析及其有效成分生物合成基因的克隆進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容及結(jié)果如下： 1 歸納發(fā)展了表型克隆方法一成分差異表型克隆法?？寺〉玫搅?個與丹酚酸類成分生物合成相關(guān)基因和5個丹參酮類成分生物合成相關(guān)基因。 2 采用HPLC的方法研究了誘導(dǎo)子組合YE+Ag<'+>及MJ對丹參毛狀根次生代謝產(chǎn)物丹參酮類成分積累的影響。 3 通過丹參cDNA芯片雜交，根據(jù)雜交結(jié)果ratio值數(shù)據(jù)，進(jìn)行Cluster

2、聚類分析和t檢驗，篩選出了基因表達(dá)差異顯著的克隆。 4 根據(jù)芯片篩選的關(guān)鍵差異基因片段，成功克隆了丹參6個基因的全長cDNA序列。 5 根據(jù)全長cDNA序列，通過翻譯的氨基酸序列分析了其中①～⑤共5個與丹參酮類成分代謝相關(guān)酶的分子特性，包括蛋白質(zhì)氨基酸序列開放讀碼框分析、功能位點分析、疏水性分析、二級結(jié)構(gòu)預(yù)測、三維結(jié)構(gòu)同源建模分析、同源性分析、分子進(jìn)化樹分析以及代謝途徑分析等詳細(xì)的蛋白分子特征信息分析。 6 建立