26454.丹參酮生物合成途徑相關(guān)酶基因的克隆和特征分析

1、上海師范大學碩士學位論文丹參酮生物合成途徑相關(guān)酶基因的克隆和特征分析姓名：王敬申請學位級別：碩士專業(yè)：遺傳學指導教師：開國銀200904012、成功地從丹參中克隆出了泐格，瑾因，該基因全長2522bp，包含一個完整的2175bp的開放閱讀框，編碼724個氨基酸殘基。根據(jù)蛋白比對的結(jié)果，SmDXSII基因編碼的氨基酸序列與其它物種中報道的已知DXSII蛋白序列具有高度的同源性。序列分析發(fā)現(xiàn)該蛋白含有一個硫胺素焦磷酸鹽綁定區(qū)域(thiami

2、npyrophosphatebindingdomain)，一個保守的嘧啶綁定區(qū)域(DRAGdomain)，和一個保守的組氨酸殘基。組織特異表達分析結(jié)果表明，觥，瑾因不是一個組成型表達的基因，觥，瑾因在根里表達量最高，在莖和葉里幾乎檢測不到表達。丹參毛狀根誘導處理結(jié)果表明，泐格，，基因至少在轉(zhuǎn)錄水平上受到誘導調(diào)控，是一個誘導應答型的基因，MJ、Ag均能非常有效地誘導鐋砒5I廠瑾因表達水平的上調(diào)。其中MJ的誘導效應相對顯著。3、成功地從丹參

3、中克隆出了砌翩般5基因，該基因全長1655bp，包含一個完整的1383bp的ORF，編碼460個氨基酸殘基。根據(jù)蛋白比對的結(jié)果，砌翩躲5基因編碼的氨基酸序列與其它物種中報道的已知HMGS蛋白序列具有高度的同源性。組織特異性表達分析結(jié)果表明，該基因在丹參中為組成性表達，在葉片中的表達最為強烈，在莖部的表達次之，在根里的表達最弱。丹參毛狀根誘導處理結(jié)果表明，砌棚舨灌因至少在轉(zhuǎn)錄水平上受到誘導調(diào)控，也是一個誘導應答型的基因，MJ、YE均能誘導

4、＆搠段噬因表達水平的上調(diào)。本文系統(tǒng)地從丹參中克隆到了三個與丹參酮生物合成相關(guān)的基因，為今后利用基因工程技術(shù)改良丹參、提高丹參酮類次生代謝產(chǎn)物含量打下了堅實的基礎(chǔ)；分析了丹參酮生物合成途徑中的三個相關(guān)酶基因在丹參不同部位的組織特異表達特征，為深入了解丹參酮類成分在不同部位的含量差異的遺傳基礎(chǔ)提供了初步的分子證據(jù)；比較分析了MJ、YE和Ag三種誘導子對丹參酮生物合成途徑的調(diào)控效應，從基因表達水平上探討了這些誘導子對丹參酮生物合成途徑可能的分