丹參酮及其衍生物的活性和作用機(jī)制研究.pdf

1、丹參是治療心血管和冠狀動(dòng)脈疾病的常用傳統(tǒng)中藥，丹參酮及其衍生物是其主要的脂溶性成分之一，具有舒張血管、抗缺血缺氧和及抗血栓形成等作用。本論文主要包括丹參酮及其衍生物對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的舒張作用，并初步探討了其構(gòu)效關(guān)系；運(yùn)用多種技術(shù)手段研究丹參酮及其衍生物與人血清白蛋白（HSA）相互作用，從分子水平上闡明其作用機(jī)制。
　　1.丹參酮ⅡA及其衍生物對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的作用研究。采用離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)灌流裝置，研究丹參酮ⅡA及其衍生

2、物（1-丹參酮ⅡA苯丙酸酯C29、1-丹參酮ⅡA咖啡酸酯C33、1-丹參酮ⅡA阿魏酸酯C34、1-丹參酮ⅡA-2-羥基-3-（3,4-二羥基苯基）丙酸酯C35、1-丹參酮ⅡA對(duì)羥甲基苯甲酸酯C36、1-丹參酮ⅡA對(duì)羥甲基苯乙酸酯C37、1-丹參酮ⅡA酪氨酸酯C38），在2×10-4 mol/L對(duì)重酒石酸去甲腎上腺素預(yù)收縮的大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的作用，并與部分衍生物的原料藥進(jìn)行了對(duì)比。另外，研究發(fā)現(xiàn)衍生物C33、C34、C35及原料藥丹參素

3、具有較好的血管舒張活性，進(jìn)而在10-5~10-4 mol/L不同濃度下，研究了衍生物C33、C34、C35及原料藥丹參素對(duì)重酒石酸去甲腎上腺素預(yù)收縮的大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的作用。丹參酮ⅡA（2.70±0.95）對(duì)去甲腎上腺素預(yù)收縮的大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)沒有明顯作用；丹參酮ⅡA衍生物及原料藥中，部分對(duì)去甲腎上腺素預(yù)先收縮的胸主動(dòng)脈血管環(huán)有一定的舒張作用，其中C33(20.12±1.55％)、C34(21.26±2.21%)、C35(25.43

4、±2.45%)、丹參素(31.93±10.74%)對(duì)去甲腎上腺素預(yù)先收縮的胸主動(dòng)脈血管環(huán)有明顯的舒張作用。丹參酮ⅡA和芳香酸類化合物衍生而成的雜化產(chǎn)物部分有一定的舒張血管作用，說(shuō)明雜化衍生物的合成提高了化合物的血管舒張效果，其機(jī)制可能通過一氧化氮-鳥苷酸環(huán)化酶途徑產(chǎn)生的舒張血管作用。
　　2.丹參酮及其衍生物與HSA相互作用研究。運(yùn)用熒光光譜法、分子對(duì)接法、質(zhì)譜法研究丹參酮及其衍生物與HSA相互作用，測(cè)定評(píng)價(jià)其作用機(jī)理、結(jié)合常數(shù)、

5、結(jié)合位點(diǎn)、結(jié)合距離、作用力類型、結(jié)合率等相關(guān)結(jié)果。熒光猝滅法結(jié)果顯示13種化合物與HSA結(jié)合得到復(fù)合物，非輻射能量轉(zhuǎn)移與靜態(tài)猝滅共同導(dǎo)致了HSA熒光猝滅；結(jié)合位點(diǎn)數(shù)約為1；13種化合物與HSA的結(jié)合主要靠氫鍵和范德華力與靜電作用力兩種作用力的存在。同步熒光和三維熒光結(jié)果表明化合物的增加導(dǎo)致HSA分子中酪氨酸殘基和色氨酸殘基的熒光均被猝滅，但化合物與HSA作用的結(jié)合位點(diǎn)更接近于色氨酸；且部分化合物與HSA相互作用導(dǎo)致HSA的微環(huán)境發(fā)生變化

6、，構(gòu)象略有改變。結(jié)合率結(jié)果表明在不同條件下，不同化合物結(jié)合率在99.99%-88.00%。分子對(duì)接結(jié)果表明13種化合物均可與HSA結(jié)合，且每個(gè)HSA分子中只結(jié)合一個(gè)化合物分子。質(zhì)譜法驗(yàn)證了化合物與HSA的結(jié)合，再次證明結(jié)合位點(diǎn)數(shù)為1。說(shuō)明了丹參酮及其衍生物與HSA能夠以非共價(jià)的結(jié)合方式形成1:1的復(fù)合物。
　　本論文首次探究了丹參酮ⅡA及其與芳香酸類雜化合成衍生物的血管舒張作用，并運(yùn)用光譜法、分子對(duì)接法、質(zhì)譜法研究丹參酮及其衍生物