重組水蛭素對(duì)大鼠皮膚撕脫傷中CD11b、CD18及ICAM-1動(dòng)態(tài)表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:通過局部運(yùn)用重組水蛭素對(duì)大鼠皮膚撕脫傷中粘附因子CD11b/CD18及ICAM-1動(dòng)態(tài)表達(dá)的研究,探討重組水蛭素對(duì)皮膚撕脫的保護(hù)與該三項(xiàng)指標(biāo)之間是否有密切關(guān)系,以及局部注射水蛭素后對(duì)大鼠撕脫皮瓣成活率的影響變化及作用機(jī)理。
　　方法:實(shí)驗(yàn)共運(yùn)用SD雄性大鼠132只,其中實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組60只、水蛭素局部注射運(yùn)用組60只以及觀察組12只,并且空白對(duì)照組及水蛭素局部注射實(shí)驗(yàn)組每時(shí)段留取4只作為皮瓣觀察存活情況。通過運(yùn)用

2、王忠堂、郭樹忠等于2008年研究的動(dòng)物模型制作成果,經(jīng)證實(shí)運(yùn)用大鼠制作皮膚撕脫模型是完全可行的,按照其設(shè)計(jì)要求并行預(yù)試驗(yàn)成功后,我們?cè)诖笫笤O(shè)計(jì)為蒂在側(cè)腹部的任意皮瓣(6cm×4cm),并給予8kg持續(xù)8秒的牽拉,遠(yuǎn)端蒂部予以保護(hù),固定后與精密儀器相連接,皮瓣撕脫后遠(yuǎn)端稍作處理后原位縫合,能夠達(dá)到相同實(shí)驗(yàn)效果,證實(shí)為撕脫皮瓣后進(jìn)行研究實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)組撕脫后皮瓣分十點(diǎn)進(jìn)行局部注射水蛭素40IU(1ml),空白對(duì)照組撕脫后皮瓣同樣分十點(diǎn)進(jìn)行局部注

3、射等量生理鹽水(1ml),正常觀察組不做任何處理,直接抽取外周血液及切取皮膚進(jìn)行檢測;實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組分別于0h、2h、4h、5h、6h、12h抽取大鼠外周血運(yùn)用流式檢測技術(shù),檢測CD11b/CD18在其中中性粒細(xì)胞胞漿顆粒內(nèi)的陽性表達(dá)率,并切取皮瓣遠(yuǎn)端組織通過免疫組織化學(xué)染色診斷檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞膜表面ICAM-1的表達(dá),同時(shí)進(jìn)行定量分析,綜合了解分析三者的動(dòng)態(tài)變化,留取的大鼠進(jìn)行皮瓣愈合情況觀察并計(jì)算撕脫皮瓣成活率。
　　結(jié)果:通

4、過對(duì)術(shù)后每時(shí)段實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照組肉眼觀察及指標(biāo)檢測對(duì)比,發(fā)現(xiàn)術(shù)后兩組皮瓣均出現(xiàn)充血水腫現(xiàn)象,對(duì)照組大鼠術(shù)后三天后遠(yuǎn)端皮瓣不同程度的出現(xiàn)淤紫現(xiàn)象,術(shù)后第六天即遠(yuǎn)端皮瓣出現(xiàn)不同程度壞死,呈現(xiàn)大小不等面積的黑色痂殼,與周圍成活組織分界清楚;經(jīng)剝離黑色痂殼后發(fā)現(xiàn)創(chuàng)面內(nèi)部有血性滲出及白色分泌物,內(nèi)面有肉芽組織生長;同時(shí)實(shí)驗(yàn)組術(shù)后三天皮瓣充血腫脹減輕,皮瓣邊緣無紅腫及滲出物,實(shí)驗(yàn)組大鼠在術(shù)后六天發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)端撕脫皮瓣存活度仍尚好,邊緣無滲出,愈合度好,同

5、時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組皮瓣成活面積率分別為90.74±1.52％、75.38±2.64％(p<0.01)有顯著差異;大鼠皮膚撕脫后血液中粘附因子CD11b/CD18的陽性表達(dá)率隨時(shí)間推移逐步上升,12h達(dá)到高峰;通過定量統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn):在0h時(shí)段實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組陽性表達(dá)率分別為24.13±2.36和24.75±3.06(p>0.05)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,第2h時(shí)段實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組陽性表達(dá)率分別為29.08±1.06和36.35±5.28(p<0.05)有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義;隨著時(shí)間段的推移,其4h、5h、6h、12h時(shí)段的陽性表達(dá)率逐步上升,分別為35.07±2.02和40.08±1.30、39.65±1.31和44.87±5.57、45.52±3.39和52.48±5.85、52.53±3.16和71.32±3.57(p<0.01)有顯著意義;雖然隨著時(shí)間的推移水蛭素局部運(yùn)用組及空白對(duì)照組 CD11b/CD18陽性表達(dá)都在上升,但是,局部運(yùn)用水蛭素后粘附因子陽性表達(dá)率明顯低于空白對(duì)照組(p<0

7、.05);同時(shí)發(fā)現(xiàn)在撕脫即刻(0h組)空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組便能檢測出ICAM-1,其陽性表達(dá)分別5.31±2.12和5.25±1.87(p>0.05)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,隨著時(shí)間段推移ICAM-1陽性表達(dá)率逐漸呈上升趨勢,在2小時(shí)、4小時(shí)、5小時(shí)、6小時(shí)及12小時(shí)時(shí)段結(jié)果分別為8.34±1.57和5.83±3.21、12.35±2.36和7.96±3.57、17.87±2.47和10.03±2.75、21.16±3.06和12.37±2.84、

8、25.35±3.56和17.36±2.32;其中空白對(duì)照組陽性表達(dá)率明顯高于水蛭素局部運(yùn)用組(p<0.01);最終表明大鼠皮膚撕脫傷后局部運(yùn)用水蛭素相對(duì)于空白對(duì)照組,皮膚撕脫后粘附因子CD11b/CD18及ICAM-1的陽性表達(dá)率有明顯的下降,水蛭素對(duì)該三項(xiàng)指標(biāo)具有明顯的干擾作用,甚至是降低作用;同時(shí)經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)運(yùn)用水蛭素組皮瓣的愈合成功率較空白對(duì)照組也有著明顯的提升。
　　結(jié)論:局部運(yùn)用重組水蛭素對(duì)大鼠皮膚撕脫傷具有有效減低血液中