壓力性肺水腫負反饋調節(jié)機制的研究.pdf

1、心力衰竭已經日益成為最常見、對患者危害最大的心血管病之一，而心源性肺水腫是心衰嚴重的并發(fā)癥，并且目前還沒有針對性的治療措施。通常認為心源性腫水腫的原因是Starling力失去平衡，最近有研究發(fā)現(xiàn)肺血管壓力變化能引起血管內皮細胞的改變，調節(jié)血管的通透性，并且可以影響肺水腫的形成。為此我們深入研究了內皮細胞在壓力性肺水腫形成過程中的作用。 我們利用實時顯微鏡顯影技術，觀察內皮細胞鈣離子(Ca2+)濃度變化和內皮生成的一氧化氮(NO)

2、的變化；通過測量離體灌注肺的重量變化計算肺的濾過系數(shù)(Kf)，證明了在肺血管靜水壓上升的情況下，內皮細胞參與的一系列病理生理反應構成一個負反饋回路，能夠保護微血管屏障。利用免疫組化和Westernboltting方法我們證實了瞬時受體電位香草素4(TRPV4)通道和磷酸二酯酶5(PDE5)在肺內皮細胞的表達。利用TRPV4通道激動劑和抑制劑，我們發(fā)現(xiàn)肺毛細血管的靜水壓的上升會激活TRPV4通道，引起Ca2+內流，而Ca2+濃度上升又激活

3、了肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)，引起平滑肌收縮，導致Kf增加，同時NO合成也增加。在TRPV4基因缺失小鼠，我們發(fā)現(xiàn)由于肺毛細血管靜水壓增高引起的Ca2+內流；NO合成增加和肺濕/干比例增大等明顯減弱，進一步印證了TRPV4在壓力性肺水腫中的作用。內皮合成的NO能夠促進環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)形成，cGMP作為重要的第二信使之一，能夠抑制靜水壓升高引起的Ca2+內流，繼而抑制血管滲透性的增加。通過原位顯影技術觀察內皮細胞Ca2+濃度，我們

4、證明了cGMP可以使TRPV4通道失活。這樣，肺毛細血管靜水壓升高引起Ca2+經由TRPV4通道流入內皮細胞，導致血管滲透性增加；但是與此同時，Ca2+內流也激活了NO參與的負反饋回路，這個負反饋反應是由cGMP介導的，能夠減輕Ca2+對內皮的傷害，起到保護血管屏障的作用。另外，在急性心肌梗塞大鼠活體模型中，我們應用了PDE5抑制劑—西地那非，它能夠抑制cGMP降解。結果證實西地那非能夠減輕壓力性肺水腫的嚴重程度。這一新的調節(jié)通路的發(fā)現(xiàn)