大鼠急性脊髓損傷后肺水腫的機制及黃芪多糖對肺水腫的保護作用的初步研究.pdf

1、觀察大鼠急性脊髓損傷后不同時間節(jié)點肺組織的水腫情況及病理改變，探討P物質及CD44含量的改變與肺水腫的關系。并探索中藥黃芪對肺水腫的抑制作用，及對P物質和CD44的影響。實驗采用C7段脊髓的大鼠Allen's打擊模型，打擊力度為10×2.5g·cm，造成大鼠脊髓損傷。觀察肺組織的病理改變和濕干重比。測定血清和肺泡灌洗液中P物質及CD44含量和蛋白濃度，計算肺通透指數(shù)。并設置對照組，觀察不同濃度黃芪對大鼠脊髓損傷后肺組織的病理改變和肺濕干

2、重比的影響，以及黃芪對P物質和CD44的影響。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠急性脊髓損傷后肺部出現(xiàn)出血和水腫，傷后3d最為嚴重，傷后1周開始減輕。肺泡灌沈液及血清中P物質含量的變化與肺水腫輕重程度成正相關，血清CD44含量變化與肺水腫輕重程度呈負相關性。而不同濃度黃芪對急性脊髓損傷后大鼠肺水腫及血清和肺泡灌洗液P物質和CD44含量有影響。大鼠急性脊髓損傷后交感神經可能過度興奮，刺激P物質的大量釋放，參與急性脊髓損傷后肺水腫的形成過程。而肺損傷后肺泡上皮

3、細胞受損，故肺泡細胞CD44表達下降，從而減弱對肺泡損傷修復能力及對炎癥反應的控制。而黃芪多糖可有效減輕大鼠急性脊髓損傷后肺水腫的程度。
　　 背景:
　　 臨床上，急性脊髓損傷(Spinal cord injury，SCI)后肺部并發(fā)癥是造成患者早期死亡的主要原因。其中最常見的并發(fā)癥為呼吸功能障礙、肺炎等。高位頸髓損傷的患者，由于呼吸機能減退，咳嗽和清除分泌物的能力下降，體位導致的排痰不暢，肺栓塞等造成肺部感染和呼吸衰

4、竭，但對于低位頸髓甚至下胸段SCI，這一觀點顯然是不充分的。因此可能存在某種更為重要的因素造成SCI后發(fā)生早期呼吸功能衰竭和肺部感染。神經源性肺水腫(Neurogenic pulmonary edema，NPE)是SCI后一種緊急而且威脅生命的嚴重并發(fā)癥，它的病理特征是肺血管充血，富含蛋白的水腫液滲出和肺泡內出血。目前認為NPE發(fā)病機制可能是由于SCI后血管活性物質的釋放和交感神經過度興奮，導致肺靜脈收縮，肺毛細血管靜水壓升高，肺泡壁受

5、損，肺毛細血管通透性增高，液體進入肺泡內形成肺水腫。
　　 急性脊髓損傷是脊柱外科一種常見的疾病，如何明確SCI早期肺部并發(fā)癥的致病機理，更好的預防和處理SCI早期肺部并發(fā)癥，一直是困擾脊柱外科醫(yī)生和神經外科醫(yī)生的難題，也是脊柱外科和神經科學領域研究的重點和難點之一。有研究發(fā)現(xiàn)，P物質可促進肥大細胞脫顆粒釋放組胺、激肽、趨化因子、前列腺素、白三烯、IL-1、IFN-γ等大量炎癥介質，可促進單核細胞分泌IL-1、IL-6、TNF-

6、α等炎癥因子，可延緩中性粒細胞凋亡，促進中性粒細胞粘附和移行，促進內皮細胞產生粘附分子，進一步加重組織炎癥反應。同時，也有研究表明急性SCI后患者的細胞免疫功能受到抑制，可引起機體非特異及特異性免疫功能障礙。而在特異性免疫中尤以細胞免疫功能受損為重，主要是T細胞的功能及自然殺傷細胞(NK細胞)的功能等受到抑制。較早研究證實黃芪作為一種傳統(tǒng)的中藥具有免疫增強作用，可明顯升高實驗組大鼠外周血T淋巴細胞CD4值。從而提高機體特異性細胞免疫功能

7、。而CD44通過肺泡Ⅱ型細胞與周圍間質和細胞連接，從而參與對肺泡損傷修復及炎癥反應。因此本課題擬觀察大鼠急性SCI后不同時間節(jié)點肺組織的病理改變及引起這一改變的機制以及黃芪多糖對SCI后肺水腫的保護作用。
　　 目的:
　　 1.探討大鼠急性脊髓損傷后不同時間節(jié)點肺組織的病理改變。
　　 2.探討大鼠急性脊髓損傷后血清和肺泡灌沈液中P物質及CD44含量的改變與神經源性肺水腫的關系，觀察黃芪多糖對肺水腫的保護作用。

8、
　　 方法
　　 1.采用C7段脊髓改良Allen's打擊法制作大鼠SCI模型，打擊力度為10×2.5g·cm
　　 2.將大鼠隨機分為實驗組和對照組。于術后第1天、第3天、1周、2周時間點處死大鼠，取肺組織，稱濕重、干重，計算濕干重之比；通過大體解剖和光學顯微鏡觀察肺組織的病理學變化。
　　 3.將大鼠隨機分為實驗組和對照組。于術后第1天、第3天、1周、2周時間點處死大鼠，檢測各組大鼠血清和肺泡灌洗液

9、中P物質和CD44含量以及蛋白濃度，計算肺通透指數(shù)。
　　 4.將大鼠隨機分為空白對照組、生理鹽水注射組、低濃度黃芪注射組、高濃度黃芪注射組和假手術組。于術后第1天、第3天、1周、2周時間點處死大鼠，取肺組織，稱濕重、干重，計算濕干重之比；通過大體解剖和光學顯微鏡觀察肺組織的病理學變化。比較不同組間肺濕干重之比和肺組織的病理學變化的差別
　　 5.將大鼠隨機分為空白對照組、生理鹽水注射組、低濃度黃芪注射組、高濃度黃芪注射

10、組和假手術組。于術后第1天、第3天、1周、2周時間點處死大鼠，檢測各組大鼠血清和肺泡灌洗液中P物質和CD44含量以及蛋白濃度，計算肺通透指數(shù)。比較不同組間P物質、CD44含量及肺通透指數(shù)的差別。
　　 結論:
　　 1.大鼠急性脊髓損傷后早期出現(xiàn)肺組織充血、出血、和肺水腫，這可能是早期呼吸功能衰竭和肺部感染的病理基礎。
　　 2.大鼠脊髓損傷后P物質的大量釋放可能參與急性脊髓損傷后肺水腫的形成過程，而CD44可能