乙酰葛根素對(duì)低糖低氧損傷大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文乙酰葛根素對(duì)低糖低氧損傷大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用姓名：蔡雅衛(wèi)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：張岫美20050516山東大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要乙酰葛根素對(duì)低糖低氧損傷大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用碩士研究生指導(dǎo)教師蔡雅衛(wèi)張岫美教授目的缺血性腦血管疾病是嚴(yán)重危害人類健康的一類疾病，是人類死亡的主要原因之一。溶栓治療在為患者帶來康復(fù)希望的同時(shí)，也帶來了不容忽視的問題一腦缺血再灌注損傷因此在缺血性腦血管疾病的治療方面在開

2、展溶栓治療的同時(shí)積極尋找有效的腦保護(hù)藥物具有重要的意義。乙酰葛根素是在葛根素的基礎(chǔ)上引入側(cè)鏈得到的新型異黃酮類化合物。實(shí)驗(yàn)證明，乙酰葛根素能縮小大腦中動(dòng)脈栓塞大鼠的腦梗死面積，提高損傷大鼠的神經(jīng)生物學(xué)評(píng)分，改善腦組織的缺血損傷，對(duì)缺血性腦血管疾病可能有一定的治療作用。本試驗(yàn)的目的是從細(xì)胞及分子水平上，通過體外培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元建立“缺血再灌注”損傷模型，觀察乙酰葛根素對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用并進(jìn)一步探討其保護(hù)作用機(jī)制。方法無菌條件下進(jìn)行大鼠皮

3、層神經(jīng)元原代培養(yǎng)，加入阿糖胞苷抑制非神經(jīng)元細(xì)胞的生長(zhǎng)進(jìn)行純化，免疫細(xì)胞化學(xué)ABC法進(jìn)行神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)鑒定，證實(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞為神經(jīng)元并確定其純度。取培養(yǎng)12d的細(xì)胞，隨機(jī)分組為：①正常組；②低糖低氧損傷組；③乙酰葛根素高、中、低濃度組(1610一mol／L、4X10一mol／L、lX101mol／L)；④葛根素組(4X10～mol／L)。正常對(duì)照組常規(guī)換液一次，除去其余各組細(xì)胞的原培養(yǎng)液，用無糖Earle’s液洗2遍后，加入

4、含5X10’4mol／L連二亞硫酸鈉的無糖Earle’s液，置培養(yǎng)箱中37℃、5％C02、飽和濕度下培養(yǎng)2h后，換成DMEM完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，模擬體內(nèi)缺血再灌注過程。各給藥組在損傷處理過程中分別加入含不同濃度乙酰葛根素或葛根素的無糖Earle’s液及DMEM完全培養(yǎng)基。再灌注損傷24h后MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的存活率，倒置相差顯微鏡下進(jìn)行一般形態(tài)學(xué)觀察，比色法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活性、H202含量，并檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SOD、GSHpx活性及