Humanin保護(hù)培養(yǎng)皮層神經(jīng)元缺氧性損傷作用的觀察.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文Humanin保護(hù)培養(yǎng)皮層神經(jīng)元缺氧性損傷作用的觀察姓名：趙珅婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：張策20060601低問(wèn)接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的能力。此外，中樞神經(jīng)元中存在大量L D r I , 其化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)十分穩(wěn)定。通常情況下神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的L D H 很少釋放，而神經(jīng)元受損后會(huì)引起L D H的大量釋放，因此L D H 測(cè)定可反映神經(jīng)細(xì)胞損傷程度。另一指標(biāo)體系是細(xì)胞活力的檢測(cè)，包括M T T 細(xì)胞活

2、力分析及C a l c e i n - A M 染色，它們都可用來(lái)反映細(xì)胞活力從而確定細(xì)胞在缺氧及缺氧復(fù)氧條件下存活率的變化。結(jié)果顯示：～、M D A 、S O D 、L D H 檢測(cè)l 觖氧引起的細(xì)胞內(nèi)及上清液中M D A 、S O D 、L D H 的改變及H N 保護(hù)作用的觀察：缺氧4 h 后細(xì)胞和上清中的M D A 、S O D 、L D H 均有顯著性升高，表明缺氧4 h 可以引起細(xì)胞損傷。預(yù)先應(yīng)用H N ( 1 0 “M )

3、 可部分降低缺氧引起的損傷，表現(xiàn)為細(xì)胞中的M D A 、S O D 、L D H 水平明顯低于單純?nèi)毖踅M，均有顯著性差異。同時(shí)可以降低上清中的S O D 和L D H水平，但是對(duì)上清中的M D A 無(wú)明顯影響。預(yù)先應(yīng)用H N ( 2 0 1 ．t M ) 可顯著降低缺氧引起的損傷。結(jié)果顯示，H N ( 2 0 ) ．t M ) 可以顯著降低細(xì)胞及上清中的M D A 、S O D 、L D H 水平，而且在應(yīng)用r r N ( 2 0 r

4、t I v O 后上述某些指標(biāo)幾乎完全恢復(fù)正常。2 ．缺氧復(fù)氧引起的細(xì)胞內(nèi)和上清液中M D A 、S O D 、L D H 的改變及H N 保護(hù)作用的觀察：缺氧復(fù)氧后，引起了細(xì)胞和上清液中M D A 、S O D 、L D H 顯著性升高。而且與單獨(dú)缺氧組相比，缺氧復(fù)氧引起的細(xì)胞損傷更顯著。細(xì)胞及上清液中M D A 、S O D 、L D H 的升高幅度明顯高于單純?nèi)毖踅M。預(yù)先應(yīng)用H N ( 1 0 “M ) 可部分降低缺氧復(fù)氧引起的損

5、傷，表現(xiàn)為細(xì)胞中的M D A 、S O D水平明顯低于單純?nèi)毖踅M，均有顯著性差異，同時(shí)可以顯著降低上清中的L D H 水平。但是對(duì)細(xì)胞中的L D H 和上清中的M D A 、S O D 無(wú)明顯影響。預(yù)先應(yīng)用H N ( 2 0 I _ t M ) 可顯著降低缺氧復(fù)氧引起的損傷。表現(xiàn)為H N ( 2 0 1 ．t M ) 可以顯著降低細(xì)胞及上清中的M D A 、S O D 、L D H 水平。二、細(xì)胞活力檢測(cè)首先應(yīng)用C a l c e i

6、n - A M 染色進(jìn)行細(xì)胞活力分析。染色結(jié)果顯示，缺氧或缺氧復(fù)氧使C a l c e i n ．A M 染色的細(xì)胞明顯減少，即有活力的細(xì)胞明顯減少。預(yù)先應(yīng)用H N ( 1 0 I _ t M ) 對(duì)缺氧或缺氧后復(fù)氧即有保護(hù)作用，H N ( 2 0 r t M ) 的保護(hù)作用明顯增強(qiáng)，表現(xiàn)為C a l c e i n —A M 陽(yáng)性染色的細(xì)胞明顯增加。M T T 活性分析結(jié)果和C a l c e i n - - A M 染色分析結(jié)果相一