神經(jīng)生長因子對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)元的保護作用.pdf

1、 目的：中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，是目前臨床上的常見病、多發(fā)病之一。它嚴重影響患者的生活質(zhì)量，對人們的生命構(gòu)成嚴重的威脅。神經(jīng)生長因子(NGF)是最早發(fā)現(xiàn)的細胞生長調(diào)節(jié)因子，在神經(jīng)元的發(fā)育、軸突的生長、遞質(zhì)的合成及細胞的凋亡等階段起著非常重要作用。本研究探討了神經(jīng)生長因子對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)元的保護作用。 方法：1.RT-PCR切取一定量的對照組與試驗組的脊髓組織，TRIzol試劑提取總RNA，行反轉(zhuǎn)錄及PCR。2.免疫組織化學(xué)染

2、色：應(yīng)用SP法對細胞內(nèi)NF-κB p65進行免疫組織化學(xué)染色，觀察實驗組與對照組NF-κB p65的表達情況。3.透射電鏡觀察：為觀察脊髓損傷后細胞凋亡的超微結(jié)構(gòu)特點，單獨取40只大鼠，分成NGF組和NS組，改良Allen’s方法制成脊髓損傷模型，分別于4、8、24h、72h處死，取出脊髓放于2.5﹪戊二醛磷酸緩沖液(pH7.2)中固定。LKB超薄切片(60μm)，同樣液體漂洗，酒精梯度(30﹪-50﹪-70﹪-80﹪-90﹪-100﹪