三氧化二砷—乳酸羥基乙酸共聚物納米粒的制備及靶向性研究.pdf

1、目的：優(yōu)化三氧化二砷-乳酸羥基乙酸共聚物納米粒(As2O3-PLGA-NP)的制備方法，考察載藥納米粒的組織分布和藥代動(dòng)力學(xué)特性。 方法： 1.As2O3-PLGA-NP的制備 首先采用單因素試驗(yàn)篩選影響納米粒包封率的主要因素及滿足目標(biāo)粒徑的水平變化范圍，然后用U15(155)均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)探討提高載藥納米粒包封率的優(yōu)化條件，并進(jìn)行優(yōu)化預(yù)測及驗(yàn)證。分別采用透射電子顯微鏡觀察納米粒表面形態(tài)，激光粒度儀測量納米粒的粒徑

2、及分布，體外釋藥試驗(yàn)和納米粒膠體溶液的初步穩(wěn)定性試驗(yàn)，對優(yōu)化條件所制得的納米粒質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估。 2.小鼠體內(nèi)組織分布試驗(yàn) 昆明種小鼠100只，體重20-25g，隨機(jī)分組，每組5只，按As2O32mg/kg劑量分別尾靜脈注射As2O3液(對照組)或As2O3-PLGA-NP膠體溶液(試驗(yàn)組)，于給藥后0.167，0.5，1，2，4，6，8，10，24，36h，共10個(gè)時(shí)相點(diǎn)，分別斷頸處死小鼠。剖取重要器官肝、脾、肺、腎、心，

3、微波消化組織，采用氫化物發(fā)生-原子熒光分光光譜法測定各組織中藥物濃度。采用PKS程序進(jìn)行房室模型的擬合并計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。 3.家兔藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn) 健康家兔6只，體重2.3-2.5kg，隨機(jī)分組，每組3只。按As2O31mg/kg耳緣靜脈注射As2O3液(對照組)或As2O3-PLGA-NP膠體溶液(試驗(yàn)組)，采用氫化物發(fā)生-原子熒光分光光譜法測定于注射后0.167，0.5，1，2，4，6，8,10，24，36h，共1

4、0個(gè)時(shí)相點(diǎn)的血藥濃度。采用PKS程序進(jìn)行房室模型的擬合并計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。 結(jié)果： 1.單因素試驗(yàn)篩選出影響載藥納米粒包封率的主要因素及滿足目標(biāo)粒徑的水平變化范圍為：As2O3/PLGA0.8％-1.6％,PLGA濃度3％-5％，超聲強(qiáng)度80w-120w，外水相/油相體積比2-4，PVA濃度2％-4％。SPSS軟件分析均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果，得多元逐步回歸方程：ER=66.994-26.815A+5.408B-0.28C+4

5、.702E，提示As2O3/PLGA，PLGA濃度，超聲強(qiáng)度和PVA濃度是影響納米粒包封率的主要因素。按優(yōu)化條件As2O3/PLGA1.2％，PLGA濃度5％，超聲強(qiáng)度80W，外水相/油相體積比為4，PVA濃度4％，制得分布均勻、形態(tài)圓整、平均粒徑178.2±2.69nm，包封率53.19±1.82％，載藥量0.64±0.02％(n=3)的載藥納米粒。優(yōu)化條件所得的三氧化二砷納米粒，在pH7.4磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行了體外釋藥試驗(yàn)，釋放曲線

6、經(jīng)函數(shù)擬合確定納米粒的釋藥方程符合一級(jí)釋放模型。在3-5℃、室溫條件下放置3天，發(fā)現(xiàn)納米粒膠體溶液的穩(wěn)定性較差，放置后藥物有滲漏。 2.小鼠體內(nèi)組織分布試驗(yàn)結(jié)果表明對照組與試驗(yàn)組在各個(gè)組織中的藥物分布有明顯差異。試驗(yàn)組的肝藥物峰濃度和藥時(shí)曲線下面積均高于對照組(P＜0.001)，且藥物分布百分率保持較高水平(51.48％-63.12％)，較對照組(22.5％-31.39％)明顯增高，納米粒在肝臟的相對攝取率(re)為3.43；試

7、驗(yàn)組脾藥物峰濃度和藥時(shí)曲線下面積高于對照組(P＜0.01)；試驗(yàn)組肺藥物峰濃度低于對照組(P＜0.01)，而藥時(shí)曲線下面積較對照組明顯增加(P＜0.01)；試驗(yàn)組心、腎的藥時(shí)曲線下面積和峰濃度均低于對照組(P＜0.01)。 3.As2O3-PLGA-NP和As2O3在肝組織的藥代動(dòng)力學(xué)行為用二室模型描述(權(quán)重為1/C)。比較兩種劑型的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，藥時(shí)曲線下面積(AUC)、分布相半衰期(t1/2α)、消除相半衰期(t1/2

8、β)、峰濃度(Cmax)、表觀分布容積(Vd)和清除率(CL)存在顯著性差異(P＜0.05)，分別是對照組的3.43倍，6.53倍，1.25倍，2.97倍，36.84％，28.89％。二者在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為用二室模型描述(權(quán)重為1/C)。比較兩種劑型的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，AUC、t1/2β，CL存在顯著性差異(P＜0.001)，As2O3-PLGA-NP分別是As2O3組的1.57倍，1.79倍，63.38％。 結(jié)論：