水貂主要細(xì)菌性肺炎的流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、近年來(lái)，隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，山東省的毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展非常迅速。目前山東省已成為我國(guó)毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖第一大省，現(xiàn)在毛皮動(dòng)物飼養(yǎng)量約占全國(guó)的二分之一左右。但是隨著我省毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)集約化程度的逐漸提高，毛皮動(dòng)物的發(fā)病率也持續(xù)上升已成為制約我國(guó)毛皮動(dòng)物產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素，給毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。水貂出血性肺炎是嚴(yán)重妨礙水貂養(yǎng)殖業(yè)的重要疫病之一，疫情日趨嚴(yán)重。研究表明，犬瘟熱病毒（Canine distemper virus，CDV）、

2、流行性感冒（Influenza）、綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa，P. aeruginosa)、水貂克雷伯氏菌(1Klebsiella peneumoniae1)、葡萄球菌（Staphylococcus）、大腸桿菌（Escherichia Coli）是引起水貂出血性肺炎的常見(jiàn)病原。本研究采用常規(guī)細(xì)菌分離鑒定技術(shù)，對(duì)109份患出血性肺炎的水貂的肺組織進(jìn)行了細(xì)菌的分離鑒定。其中未能純培養(yǎng)的有10株，可純培養(yǎng)的有99株

3、，純培養(yǎng)的99株細(xì)菌在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上表現(xiàn)各種不同的生長(zhǎng)形態(tài)。
　　提取細(xì)菌基因組DNA后，釆用PCR方法利用細(xì)菌16SrRNA序列通用的引物16S-1492R和16S-27F進(jìn)行擴(kuò)增后測(cè)序獲得菌株16SrRNA基因序列。用NCBI-BLAST軟件，將測(cè)序序列在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行同源性檢索分析，初步確定細(xì)菌的種屬，再根據(jù)細(xì)菌在生化反應(yīng)中表現(xiàn)的特性確定細(xì)菌種屬。
　　經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)鑒定的結(jié)果表明，99株細(xì)菌中，其中31株

4、克雷伯氏菌，該菌的檢出率為28.4％(31/109)；13株綠膿桿菌，該菌的檢出率為11.9%(13/109)；34株大腸桿菌，該菌的檢出率為31.2%(34/109)；8株葡萄球菌,該菌的檢出率為7.3%(8/109)；2株變形桿菌，3株糞腸球菌，2株奇異變形桿菌，2株芽孢桿菌，1株枸櫞酸桿菌，1株弗氏檸檬酸桿菌，1株蠟樣芽孢桿菌，1株橙黃微小桿菌。16SrRNA序列同源性分析結(jié)果表明，13株綠膿桿菌分離菌間的核苷酸序列同源性為84.

5、2%-100%，其中，除SD P.a-9與其他12株間的同源性較低，在84.2%-87.3%之間，其他12株間的同源性相對(duì)較高。遺傳演化分析結(jié)果顯示SD P.A-9與其他12株同源性較低，處于第一分支。SD P.a-4和SD P.a-12親緣關(guān)系較近，SD P.a-1和參考株DM5、s7ps5與同一小分支上親緣關(guān)系較近。分離的31株克雷伯氏菌分離菌間的核苷酸序列同源性為75.2%-100%，SD Kp8與其他30株同源性較低，為75.2

6、%-76.6%。其余30株同源性均較高。遺傳演化分析結(jié)果顯示SD Kp8與其余30株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，處于第一分支。分離的34株大腸桿菌分離菌間的核苷酸序列同源性為96.3%-100%，同源性很高。遺傳演化分析結(jié)果顯示在進(jìn)化關(guān)系上SD Eco-4與其他33株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，處于第一分支，其他33株處于第二分支，親緣關(guān)系均較近。分離的8株葡萄球菌分離菌間的核苷酸序列同源性為97.3%-100%，SD Sau-5與SD Sau-6間的同源性較高，

7、處于一個(gè)小分支。但sau5、sau6與其他六株的同源性較低。SD sau1、SD sau2、SD sau3、SD sau4、SD sau7、sau8六株之間的同源性較高，均在98%以上。遺傳演化分析結(jié)果顯示在進(jìn)化關(guān)系上SD sau5與SD sau6親緣關(guān)系較近，處于第一分支。SD sau2和SD sau3親緣關(guān)系較近，和SD sau4親緣關(guān)系較近，SD sau7與SD sau8親緣關(guān)系較近。SD sau1、SD sau2、SD sau3

8、、SD sau4、SD sau7、sau8六株處于進(jìn)化樹(shù)的第二分支。
　　通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株克雷伯氏菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌對(duì)氟苯尼考，阿米卡星，頭孢他啶，氧氟沙星等藥敏感；通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株綠膿桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)該菌對(duì)頭孢哌酮，鏈霉素，阿米卡星，頭孢他啶，氧氟沙星等藥敏感;通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌對(duì)頭孢曲松，頭孢噻肟，頭孢他啶，阿米卡星，氟苯尼考等藥敏感；通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株葡萄球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌對(duì)阿莫西