洛貝林逆轉(zhuǎn)結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-8-VCR多藥耐藥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的：化療是惡性腫瘤的主要治療手段之一，腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的多藥耐藥性（multidrug resistance，MDR）是化療失敗的主要原因，占化療失敗的90％以上。因此，MDR的逆轉(zhuǎn)有著重要的意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。生物堿類(lèi)的天然有效成分被證明具有逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的作用。洛貝林（Lobeline），是一種哌啶類(lèi)生物堿，能選擇性地興奮頸動(dòng)脈體化學(xué)感受器，反射地興奮呼吸中樞，大劑量也能直接興奮呼吸中樞。國(guó)外有學(xué)者通過(guò)研究證明洛貝林能抑

2、制P-gp的活性，洛貝林的MDR逆轉(zhuǎn)可能性能在阿霉素化療的細(xì)胞中得到證明，洛貝林能增加耐藥腫瘤細(xì)胞的化療敏感性。本實(shí)驗(yàn)的目的在于探討洛貝林逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的機(jī)制，并與已知的具有逆轉(zhuǎn)P-gp介導(dǎo)的MDR的藥物維拉帕米比較，評(píng)估其有效性。 方法：以人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-8/VCR為研究對(duì)象，用四氮唑藍(lán)（MTT）法測(cè)定不同濃度的長(zhǎng)春新堿和5-氟尿嘧啶對(duì)細(xì)胞的抑制率及在洛貝林干預(yù)下二者對(duì)細(xì)胞的抑制率，由此求取耐藥逆轉(zhuǎn)的倍數(shù)；用微孔板熒光分光

3、光度計(jì)測(cè)定在無(wú)干預(yù)措施、不同濃度的洛貝林干預(yù)下HCT-8/VCR細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的熒光強(qiáng)度；用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定在無(wú)干預(yù)措施、洛貝林20μM、維拉帕米20μM干預(yù)下HCT-8/VCR細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的積聚濃度。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果：通過(guò)MTT法求得上述實(shí)驗(yàn)條件下細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率，表明不同濃度的長(zhǎng)春新堿和5-氟尿嘧啶對(duì)HCT-8/VCR細(xì)胞株具有抑制作用，其抑制作用與濃度呈正相關(guān)；加洛貝林干預(yù)后，HCT

4、-8/VCR細(xì)胞株對(duì)長(zhǎng)春新堿和5-氟尿嘧啶的敏感性增加；羅丹明123排出實(shí)驗(yàn)示經(jīng)洛貝林處理的HCT-8/VCR細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的熒光強(qiáng)度高于未經(jīng)處理的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度，且細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的熒光強(qiáng)度與洛貝林的濃度呈正相關(guān)；流式細(xì)胞術(shù)顯示，20μM洛貝林的逆轉(zhuǎn)MDR的有效率是20μM維拉帕米有效率的68％。 結(jié)論：洛貝林可以逆轉(zhuǎn)人結(jié)腸癌多藥耐藥細(xì)胞株HCT-8/VCR對(duì)VCR和5-FU的耐藥性。洛貝林可以增加人結(jié)腸癌多藥耐藥細(xì)胞株