山東省仔豬腹瀉相關(guān)病毒感染狀況調(diào)查及流行性腹瀉病毒S基因的遺傳進(jìn)化分析.pdf

1、新生仔豬腹瀉是造成仔豬高死亡率及影響豬場(chǎng)生產(chǎn)成績(jī)和經(jīng)濟(jì)效益的重要因素，導(dǎo)致腹瀉的因素除飼養(yǎng)管理不良外，病原感染是最重要的影響因素。引起仔豬腹瀉的病原主要有兩類，即病毒和細(xì)菌。其中病毒性因素是當(dāng)前引起新生仔豬腹瀉的主要因素。臨床上仔豬病毒性腹瀉混合感染現(xiàn)象較為普遍，致腹瀉病毒的侵害部位、致病性質(zhì)、臨床癥狀及病理變化極為相似，很難單純依靠臨床癥狀及病理變化進(jìn)行確診，給仔豬腹瀉病的診斷、防制工作帶來(lái)了極大的挑戰(zhàn)。
　　為了明確山東省20

2、14-2015年仔豬腹瀉相關(guān)病毒的感染狀況及發(fā)病規(guī)律，建立豬流行性腹瀉病毒防控技術(shù)。我們對(duì)山東省2014-2015年間部分仔豬腹瀉患病豬場(chǎng)的發(fā)病情況進(jìn)行了調(diào)查分析，搜集了山東省多個(gè)地市的68份病情較重的仔豬腹瀉臨床病例，采集病料，對(duì)胃腸道組織學(xué)病變進(jìn)行了觀察，利用RT-PCR/PCR技術(shù)及免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行了相關(guān)病毒檢測(cè)。結(jié)果表明，山東省仔豬腹瀉病的發(fā)病季節(jié)性越來(lái)越不明顯，由寒冷冬春季節(jié)多發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)樗募境０l(fā)，并且發(fā)病日齡有擴(kuò)大趨勢(shì)，病情

3、也顯著加重，給仔豬病毒性腹瀉的防控帶來(lái)了更大的挑戰(zhàn)。流行毒株主要侵害以空腸為主的小腸段黏膜上皮細(xì)胞，腸道表現(xiàn)急性出血性壞死性炎癥。病毒檢測(cè)結(jié)果顯示，在68份病料中致腹瀉病毒的檢出率為88.24％（60/68），其中PEDV單獨(dú)感染致病的比例為82.35%（56/68），TGEV單獨(dú)感染并致病的比例為2.94%（2/68），腹瀉性病毒混合感染并致病的比例為2.94%（2/68），但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)因PoRV單獨(dú)感染致病的病例。研究結(jié)果表明山東省新

4、生仔豬腹瀉主要由病毒感染所致，以PEDV單獨(dú)感染為主，其中腹瀉性病毒混合感染的比例較低，TGEV單獨(dú)感染并致病的比例極低；PEDV已經(jīng)成為導(dǎo)致山東省豬場(chǎng)仔豬病毒性腹瀉的主要病原。
　　為了進(jìn)一步揭示PEDV的分子特征和分子流行病學(xué)規(guī)律，為防控 PED提供理論依據(jù)，對(duì)10株山東PEDV分離株的纖突蛋白基因（S）的全長(zhǎng)進(jìn)行序列測(cè)定及分析。結(jié)果表明10株P(guān)EDV的S基因全長(zhǎng)為4161-4170nt，編碼1387-1390個(gè)氨基酸。同源性

5、分析結(jié)果表明，10株山東分離株間的核苷酸同源性（97.9%-99.5%）和氨基酸同源性（96.9%-98.8%）較高；山東分離株與美國(guó)株 MN及中國(guó)株 KJL-2012的核苷酸同源性（98.2%-99.4%）和氨基酸同源性（97.8%-99.1%）較近，而與國(guó)內(nèi)早期分離的毒株 CH/S(1986)、比利時(shí)株 CV777及國(guó)內(nèi)使用的疫苗株CV777核苷酸同源性（93.4%-93.9%）和氨基酸同源性（92.2%-92.9%）較遠(yuǎn)。氨基酸序