山東省仔豬腹瀉主要病原調查研究.pdf

1、試驗主要從山東省5個地區(qū)的50例疑似豬源性致病性大腸桿菌病例中分離出的48株豬源性大腸桿菌進行O血清型鑒定、耐藥性及致病性研究。O血清型鑒定試驗結果表明:48株豬源性大腸桿菌分屬14種血清型，其中，流行的主要血清型為O139(18.75％)、O119(16.67％)、O89(12.50％)和O20(12.50％)，共29株，占定型菌株的60.42％。耐藥性試驗結果表明:48株豬源性大腸桿菌對青霉素類抗生素、四環(huán)素類抗生素和氯霉素類抗生素

2、耐藥嚴重，以四環(huán)素、卡那霉素、氯霉素、阿莫西林和鏈霉素最為嚴重，對頭孢菌素類和氨基糖苷類抗生素敏感，以頭孢唑啉、丁胺卡那霉素和菌必治最為敏感，各分離菌株均有不同程度的多重耐藥性。致病性試驗結果表明:48株豬源性大腸桿菌對小白鼠具有致病性。
　　 根據(jù)Genbank中豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的基因組序列，結合兩種病毒基因組結構特點，在對兩種病毒基因序列進行同源性比較的基礎上，選擇二者的S蛋白基因

3、為引物設計區(qū)，根據(jù)PCR引物設計原則，應用Primer5.0軟件設計出TGEV和PEDV各兩條引物。其中，TGEV的引物可擴增出212bp的特異片段，PEDV的引物可擴增出241 bp的特異片段。試驗歸納出TGEV和PEDV單項RT-PCR體系的最優(yōu)引物濃度和退火溫度為:引物濃度，TGEV0.8-1.0μmol/L，PEDV1.0μmol/L，退火溫度，TCEV54℃，PEDV58℃。對山東省不同地區(qū)的24例疑似病毒性腹瀉病例進行RT-