熊果酸誘導(dǎo)肝癌BEL-7404細(xì)胞調(diào)亡及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討熊果酸（Ursolic Acid, UA）對人肝癌BEL-7404細(xì)胞的生長增殖抑制作用和誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。方法：以體外人肝癌BEL-7404細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)，并設(shè)陰性對照組、實驗組及陽性對照組進(jìn)行實驗，應(yīng)用MTT法檢測UA對肝癌BEL-7404細(xì)胞增殖的抑制作用，透射電子顯微鏡、Hoechst33258染色、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生，Western Blot檢測凋亡相關(guān)蛋白procaspase-3、caspase-9及sur

2、vivin表達(dá)，以探討UA誘導(dǎo)肝癌BEL-7404細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制。結(jié)果：① MTT結(jié)果表明UA對肝癌BEL-7404細(xì)胞具有增殖抑制作用，其中UA50μmol/L及DDP10μg/ml作用48小時的增殖抑制作用最佳，并作為本研究的實驗條件進(jìn)行實驗；②透射電鏡可見早期凋亡細(xì)胞膜外絨毛消失，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與胞膜融合，形成空泡。晚期凋亡細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)濃縮，出現(xiàn)凋亡小體；③ Hoechst33258染色示：凋亡細(xì)胞染色質(zhì)濃染，呈現(xiàn)藍(lán)白色熒光；④流式

3、細(xì)胞術(shù)結(jié)果示：順鉑(ciplatin，DDP)組、UA組的凋亡率較陰性對照組高(F=3698.99，P＜0.01）；⑤Western Blot檢測發(fā)現(xiàn)，凋亡相關(guān)蛋白procaspase-3、survivin表達(dá)降低，caspase-9表達(dá)增加。結(jié)論：UA對人肝癌BEL-7404細(xì)胞有顯著的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡作用。機(jī)制可能為：UA作用肝癌BEL-7404細(xì)胞后，觸發(fā)內(nèi)源性凋亡信號傳導(dǎo)通路，引起caspase-9的表達(dá)增加，進(jìn)而作用于pro