溴丙烷男(雄)性生殖毒性及凋亡機制的研究.pdf

1、目的：通過動物實驗及職業(yè)人群的調查，闡明溴丙烷兩種同分異構體對男（雄）性生殖系統(tǒng)的毒性作用，以及通過動物模型探討溴丙烷生殖毒性的作用機理。本研究為最終闡明溴丙烷的人類生殖毒性，制定溴丙烷的職業(yè)衛(wèi)生標準提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴選取某兩省的5家1-溴丙烷生產工廠的85名男性工人為暴露組，86名不接觸有毒有害化學物質的男性工人為對照組。受過培訓的專業(yè)調查人員對兩組工人進行問卷調查，采用氣象色譜質譜法分析工人接觸溴丙烷的外暴露濃度

2、，并采集工人的精液進行常規(guī)分析。⑵21只雄性大鼠隨機分為對照組，1-溴丙烷組和2-溴丙烷組，溴丙烷處理組每天經腹腔注射1g/kg的溴丙烷，對照組注射溶劑橄欖油，連續(xù)腹腔注射2 周。對大鼠的附睪進行精子數(shù)量和形態(tài)學評價；運用HE 染色對睪丸的病理變化進行評價；運用TUNEL 染色法和Caspase-3活性的免疫組化法對大鼠睪丸的凋亡損傷進行評價；利用化學比色法對附睪和睪丸的GSH和MDA等氧化應激指標進行測定；實時定量PCR法和Weste

3、rn blotting 對凋亡相關基因Bax、Bcl-2、P53、Fas和FasL的mRNA和蛋白表達水平進行測定。
　　 結果：①人群調查結果顯示，1-BP低暴露組工人精液質量較對照組人群無明顯變化，而1-BP 中暴露組和高暴露組工人精液粘稠度和精子量顯著低于對照組（P<0.05）。②動物實驗結果顯示，1-BP 暴露使大鼠體重和生殖器重量均低于對照組（P<0.05），而2-BP 只影響大鼠體重；與對照組相比，BPs的暴露使大鼠

4、附睪精子的絕對數(shù)量和相對數(shù)量均顯著降低（P<0.01），1-BP 主要使精子無尾比例增加（P<0.01），而2-BP 主要使大鼠精子中頭部異常精子的比例增加（P<0.01）；對照組和1-BP 組睪丸組織的病理切片未見生精小管和生殖細胞發(fā)生明顯的異常改變，而2-BP 暴露使得大鼠睪丸的生殖細胞減少，生精小管發(fā)生萎縮壞死，并有空泡的出現(xiàn)；TUNEL 結果顯示，對照組大鼠睪丸的生精小管中很少出現(xiàn)陽性凋亡細胞，BPs 使大鼠睪丸的平均每生精小管

5、的陽性細胞數(shù)顯著增加，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），且2-BP 凋亡較1-BP 嚴重；2-BP 暴露使得Caspase-3 active的活性顯著高于對照組。與對照組相比，1-BP 組大鼠睪丸組織中凋亡相關基因mRNA和蛋白表達水平變化無差異，而2-BP 暴露可使大鼠睪丸的p53、Bax和Bcl-2等3個基因mRNA和蛋白表達水平下調均有統(tǒng)計學意義（P<0.01，P<0.01，P<0.01），但Fas和FasL的變化與對照組相比，差

6、異無統(tǒng)計學意義。
　　 結論：通過對1-BP 生產工廠工人的研究發(fā)現(xiàn)，1-BP對接觸的工人具有一定的生殖毒性。動物實驗的結果也證實，相同劑量的條件下BPs 兩種同分異構體都對大鼠具有一定的毒性作用，但兩者具有不同的作用靶器官，且2-BP的生殖毒性可能高于1-BP。1-BP 可能是通過影響精子的成熟、獲能或其他途徑，導致了精子釋放的延遲和精子形態(tài)的異常。2-BP可能是通過激活生殖細胞的凋亡，從而引起生殖細胞的變性和死亡，產生生殖毒