四溴雙酚-A與鎘氣相暴露對小鼠肺和生殖毒性的研究.pdf

1、四溴雙酚-A(Tetrabromobisphenol A，TBBPA)是目前全球生產(chǎn)量和使用量最大的溴代阻燃劑（brominated flame retardants，BRFs）之一，在環(huán)境中廣泛存在，如土壤、水體、大氣、食物等，鎘(Cd)也是環(huán)境中普遍存在的物質(zhì)之一，環(huán)境中的鎘主要來源于工業(yè)污染。目前有關(guān)TBBPA及Cd的分別報(bào)道數(shù)量很多，其中TBBPA對肝腎、神經(jīng)、內(nèi)分泌干擾效應(yīng)及神經(jīng)毒性等的研究有了一定程度的認(rèn)識(shí);而Cd對生殖、肝

2、腎、免疫、癌癥等的研究也取得很大的進(jìn)展。但關(guān)于兩種物質(zhì)的單獨(dú)氣相和復(fù)合氣相暴露對肺毒性和生殖毒性的影響和機(jī)制報(bào)道國內(nèi)外報(bào)道甚少。
　　本研究分為兩個(gè)實(shí)驗(yàn)分支:第一個(gè)實(shí)驗(yàn)為TBBPA梯度濃度單獨(dú)暴露，四個(gè)柜中經(jīng)進(jìn)樣瓶吸入的液體及其濃度分別為DMSO（對照組），DMSO+0.1μg/m3，DMSO+1μg/m3，DMSO+10μg/m3;第二實(shí)驗(yàn)為TBBPA+CdCl2復(fù)合暴露，四個(gè)柜中經(jīng)進(jìn)樣瓶中吸入的液體及其濃度分別為: DMSO（

3、對照組），DMSO+400ng/ml CdCl2, DMSO+800ng/ml TBBPA, DMSO+400 ng/mlCdCl2+800ng/mlTBBPA，通過液泵盒的作用，進(jìn)樣瓶中的液體以1ml/min的速度流入暴毒柜中的噴頭里，再通過空壓機(jī)壓力作用把泵入的液體轉(zhuǎn)換成氣相狀態(tài)擴(kuò)散入暴毒柜內(nèi)。將8w齡雄性CD1小鼠暴露于氣相暴毒柜中，每天暴露8個(gè)小時(shí)（上午4h，下午4h，中午從暴毒柜中取出喂食2h），每周暴露5天，連續(xù)暴露8w，暴

4、毒完畢后每組取10只立即處理，取肺灌洗液，肺組織，睪丸組織及精子測定相關(guān)指標(biāo)，并且復(fù)合暴露的批次中每組留10只按正常飼養(yǎng)放置1個(gè)月后用于肺毒性和生殖毒性的滯后效應(yīng)評價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:(1) TBBPA氣相梯度濃度單獨(dú)暴露對肺的影響1）對肺灌洗液的影響:與對照組相比，灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)、巨噬細(xì)胞數(shù)、多形核白細(xì)胞數(shù)、總蛋白含量、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶均不同程度呈升高趨勢;2）對肺組織的影響:與對照組相比，肺組織重量臟器系數(shù)（雙肺重量×100

5、/體重）呈升高趨勢，脂質(zhì)氧化水平呈上升趨勢，總超氧化物歧化酶水平升高。3）實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測結(jié)果:與對照組相比，SP-A、SP-B、SP-D、CCSP上調(diào)。4）組織切片觀察:與對照組相比，0.1 ug/m3組肺組織形態(tài)上未發(fā)生明顯改變，1 ug/m3、10ug/m3組肺組織肺炎癥滲出增多，氣管內(nèi)炎癥細(xì)胞增多，氣管壁增厚，氣管腔變窄。(2) TBBPA+Cd復(fù)合氣相暴露對肺毒性的影響1）對肺灌洗液的影響:立即處理的小鼠批次中，與對照

6、組相比，灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)、巨噬細(xì)胞數(shù)、多形核白細(xì)胞數(shù)未見顯著差異，肺灌洗液中IL-1β、LDH、ALP、總蛋白均有不同程度呈升高趨勢;滯后的小鼠批次中，與對照組相比，灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)、巨噬細(xì)胞數(shù)、多形核白細(xì)胞數(shù)也未見顯著差異、LDH、總蛋白均不同程度呈降低趨勢。2）對肺組織的影響:立即處理的小鼠批次中，與對照組相比，各處理組小鼠肺組織中MDA及TAOC均有不同程度的增高;滯后的小鼠批次中未見顯著差異，與對照組相比，處理組小鼠肺中MD

7、A均有不同程度的呈升高趨勢，而T-AOC呈下降趨勢。3）組織切片觀察:與對照組相比，Cd、TBBPA組肺組織形態(tài)上未發(fā)生明顯改變，TBBPA+Cd組肺組織肺炎癥滲出增多，氣管內(nèi)炎癥細(xì)胞增多。(3) TBBPA+Cd復(fù)合氣相暴露對生殖毒性的影響1）對精子的影響:立即處理的小鼠批次中，與對照組相比，鎘組的精子密度及活力均呈下降趨勢，丙二醛(MDA)呈升高趨勢，滯后的小鼠批次中，與對照組相比，鎘組的精子密度及活力均呈下降趨勢，MDA呈升高趨勢

8、。2）對睪丸組織的影響:立即處理的小鼠批次中，與對照組相比，鎘組總超氧化物歧化酶(總SOD)及MDA水平呈升高趨勢，睪丸病理切片各組未見明顯差異;滯后的小鼠批次中，與對照組相比，鎘組總SOD及MDA水平均呈降低趨勢。3）組織切片觀察:立即處理及滯后批次中睪丸病理切片各組未見明顯差異。
　　綜合本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，可以得出如下結(jié)論(一)TBBPA梯度濃度單獨(dú)暴露:(1) TBBPA氣相暴露能引起肺組織炎癥作用;(2) TBBPA氣相暴露

9、能引起肺組織細(xì)胞膜損傷;(3) TBBPA氣相暴露可激發(fā)肺組織自身的免疫保護(hù)作用;(4)TBBPA氣相暴露可激發(fā)自身抗炎及抗纖維化作用。（二）TBBPA+CdCl2復(fù)合暴露:(1)生殖毒性 1）總體來說TBBPA與Cd的復(fù)合氣相暴露對生殖無論是脫毒前還是脫毒后均未產(chǎn)生明顯的影響;2）TBBPA與Cd對生殖的相互作用復(fù)雜。(2)肺毒性 1）TBBPA與Cd的復(fù)合氣相暴露引起肺組織的炎癥反應(yīng)及肺組織細(xì)胞膜的損傷;2）脫毒后BALF中相關(guān)指標(biāo)