新一代抗癲癇藥對(duì)新生鼠腦發(fā)育的影響.pdf

1、目的：探討與臨床急救劑量相匹配的傳統(tǒng)抗驚厥藥物一次性單藥或聯(lián)合用藥對(duì)新生鼠腦發(fā)育的影響。
　　 方法：以臨床劑量換算大鼠用藥劑量,分別設(shè)立健康PD7新生鼠單藥組:苯巴比妥(PB)、地西泮(DZP)、苯妥英鈉(PHT)；聯(lián)合用藥組:苯巴比妥聯(lián)合地西泮(PB+DZP)、苯巴比妥聯(lián)合苯妥英鈉(PB+PHT):以及正常對(duì)照組(Cont)。稱量并觀察給藥前后PD7新生鼠的體重及給藥后腦重改變；用藥后24小時(shí)HE、Nissl染色觀察腦組織病

2、理學(xué)改變。ELISA測(cè)定血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)含量,免疫組化檢測(cè)皮層Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)；原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)細(xì)胞凋亡；熒光分光光度儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞Caspase-3活性。并于給藥后16日(PD23)行Morris水迷宮測(cè)試和光鏡下Nissl染色顳葉皮層及海馬神經(jīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)。
　　 結(jié)果：(1)用藥各組均不同程度的抑制新生鼠體重增長,且PHT、PB+DZP、PB+PHT引起PD7新生鼠腦重顯著降低(P<

3、0.01)。HE染色可見PB組、DZP組、PHT組海馬出現(xiàn)部分神經(jīng)細(xì)胞核固縮、細(xì)胞皺縮等病理改變。聯(lián)合用藥組病變程度明顯大于單藥組。Nissl染色見部分神經(jīng)細(xì)胞Nissl氏體溶解消失,聯(lián)合用藥組同樣比單藥組嚴(yán)重。(2)PB、PHT、PB+DZP、PB+PHT組血清NSE濃度較對(duì)照組[(0.282±0.1340)ng/L]顯著增高,分別高出52.48％、67.02％、152.48％和175.53％(P<0.01)；PB+DZP和PB+PH

4、T組分別高出PB單藥65.58％和80.20％(P值均<0.01)。(3)PB+PHT組Bcl-2蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組顯著降低(P<0.05),各用藥組Bax蛋白的表達(dá)顯著強(qiáng)于正常對(duì)照組(P<0.05)；PB、DZP、PHT、PB+DZP、PB+PHT組海馬下托TUNEL染色陽性細(xì)胞數(shù)較對(duì)照(14.86±5.40)組顯著增多,分別增加4.74倍、3.27倍、5.44倍、6.20倍、6.99倍(P<0.01)；PB+DZP和PB+PHT組

5、分別高出PB1.31倍和1.47倍(P<0.01)。用藥各組額葉皮層及海馬Caspase-3活性較對(duì)照組顯著增高(P<0.05)。(4)給藥后16日(PD23)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn),聯(lián)合用藥組的平均尋臺(tái)潛伏期顯著長于對(duì)照組(P<0.01)；PHT組(1.38±1.06次)、PB+DZP組(1.38±2.00次)、PB+PHT組(1.12±1.126次)大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)顯著少于對(duì)照組(3.12±0.99次)(P<0.01)。PB、DZ

6、P組大鼠水迷宮表現(xiàn)與對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(5)給藥后23日(PD30)大鼠HE染色聯(lián)合用藥組顳葉皮層可見退行性紅色神經(jīng)細(xì)胞明顯增多。Nissl氏染色400倍光鏡下神經(jīng)元計(jì)數(shù),各組大鼠顳葉皮層神經(jīng)元計(jì)數(shù)與對(duì)照組無顯著性差異,海馬神經(jīng)元數(shù)目與對(duì)照組(82.8±14.44)比較,PHT組、PB+DZP組、PB+PHT組的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量分別減少22.6％、23.8％、31.3％(P<0.01)。
　　 結(jié)論：(1)即使一