明膠-白芨膠載藥多孔材料的研制及其對創(chuàng)面愈合的影響.pdf

1、創(chuàng)面的修復(fù)是創(chuàng)傷外科領(lǐng)域中最重要、最基本的問題之一。隨著科技的發(fā)展，工業(yè)、交通等造成創(chuàng)傷患者日益增多，創(chuàng)面的修復(fù)這一古老的醫(yī)學(xué)課題亦越來越引起人們的關(guān)注，現(xiàn)已成為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。創(chuàng)面無菌覆蓋是外科治療的常規(guī)方法，可以為創(chuàng)傷愈合提供一個(gè)良好的微環(huán)境，是防止感染、減少并發(fā)癥的重要步驟，對于創(chuàng)面修復(fù)材料的研究，一直是廣大創(chuàng)傷工作者的研究目標(biāo)。傷口愈合的研究作為醫(yī)學(xué)界的重要課題，中醫(yī)藥學(xué)在這方面的研究具有悠久的歷史和獨(dú)特的優(yōu)勢。長期的實(shí)踐表

2、明很多中藥制劑在與人體組織、體液或血液接觸和相互作用時(shí)，具有良好的生物相容性，因此可以與生物材料復(fù)合，使材料的理化性能以及功用得到改善。明膠和白芨膠都是極有前途的天然高分子物質(zhì)，有良好的可降解性和組織相容性，近年來，在創(chuàng)面修復(fù)材料的研制和開發(fā)中顯示了其廣闊的應(yīng)用前景，本研究嘗試將現(xiàn)代材料學(xué)與中醫(yī)藥學(xué)相結(jié)合，利用中藥對復(fù)合材料的性能進(jìn)行改進(jìn)，以明膠和白芨膠為支架材料，將黃連、丹參的中藥提取物復(fù)合到基質(zhì)材料中，通過冷凍干燥法制備成為具備生物

3、敷料和藥物雙重功效的海綿狀多孔材料，為中醫(yī)藥學(xué)與材料學(xué)及與組織工程學(xué)的結(jié)合提供研究思路。我們進(jìn)行了以下三個(gè)部分的實(shí)驗(yàn)研究： 一、明膠/白芨膠載藥多孔材料的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 目的：探討明膠/白芨膠載藥多孔材料科學(xué)合理的制備工藝，建立產(chǎn)品的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。 方法：從原料的品種和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、中藥提取液的提取工藝、多孔材料的制備工藝，尤其制備過程中明膠的用量對材料物理性能的調(diào)節(jié)作用等方面進(jìn)行了明膠/白芨膠多孔材料的制備

4、工藝研究。確定藥材和輔料來源及標(biāo)準(zhǔn)；應(yīng)用薄層色譜法鑒別黃連；制定了產(chǎn)品水溶性浸出物的含量、孔隙率、透氣率、抗撕強(qiáng)度、吸水力及無菌檢查等檢查方法和標(biāo)準(zhǔn)，在此基礎(chǔ)上制定了初步的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：明膠/白芨膠載藥多孔材料的制備工藝：以藥典的標(biāo)準(zhǔn)作為產(chǎn)品生產(chǎn)原料的品種和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；將丹參(SalviamiltiorrhizaBge.)用其80％乙醇(用量為藥材量10倍)，回流提取1.5小時(shí)，提取2次，藥液濾過，濃縮成浸膏；黃連(Cop

5、tisChinensisFranch.)粗粉(1號篩)，合并丹參醇提后殘?jiān)?，?倍量水，回流提取2.0小時(shí)，提取3次，藥液濾過，濃縮成浸膏；兩種浸膏各取適量(相當(dāng)于10g丹參藥材量和10g黃連藥材量)，分別加入30ml蒸餾水，丹參浸膏不能完全溶解，在水中將其進(jìn)一步研磨成細(xì)粉，最后將兩種溶液混合，即得到中藥提取液；再取明膠7g、白芨膠2g，浸入蒸餾水30ml中，待充分膨脹后，再加入上述中藥提取液和10ml蒸餾水，置55℃左右的水浴中使其溶

6、解，攪拌均勻后置普通冰箱(-20℃)預(yù)冷凍24小時(shí)以上，然后經(jīng)冷凍干燥，形成多孔松軟的海綿狀明膠/白芨膠載藥多孔材料，切成不同規(guī)格后，在120℃溫度下干風(fēng)消毒2小時(shí)備用。明膠/白芨膠載藥多孔材料產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：黃連的定性鑒別分離度好、專屬性強(qiáng)；產(chǎn)品水溶性浸出物的含量標(biāo)準(zhǔn)暫定為不少于40％；孔隙率標(biāo)準(zhǔn)暫定為不小于90％；透氣率標(biāo)準(zhǔn)暫定為45％-65％之間；吸水力標(biāo)準(zhǔn)暫定為不小于10倍；抗撕強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)暫定為不小于140g/cm3明膠/白芨膠載藥

7、多孔材料浸提液的pH值暫定為5.5-7.5之間；無菌檢查應(yīng)為無菌。 結(jié)論：明膠/白芨膠載藥多孔材料的制備工藝可行；所建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可用于明膠/白芨膠載藥多孔材料的質(zhì)量控制。 二、明膠/白芨膠載藥多孔材料的生物學(xué)評價(jià) 目的：評價(jià)明膠/白芨膠載藥多孔材料的安全性，為該產(chǎn)品作為創(chuàng)面敷料材料和皮膚、肌腱組織工程支架材料提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：根據(jù)衛(wèi)生部的生物材料和醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生物學(xué)評價(jià)，包括急性毒性實(shí)

8、驗(yàn)、皮膚刺激實(shí)驗(yàn)、致敏實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)；還通過體內(nèi)植入法，將明膠/白芨膠載藥多孔材料植入兔背部肌肉內(nèi)，術(shù)后1、2、6周取材，通過大體觀察和組織學(xué)檢查觀察生物材料在體內(nèi)組織反應(yīng)。 結(jié)果：載藥材料在急性毒性實(shí)驗(yàn)、皮膚刺激實(shí)驗(yàn)、致敏實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等指標(biāo)上均符合規(guī)定要求，材料植入兔肌肉內(nèi)后可以降解，未引起明顯的炎癥和異物排斥反應(yīng)。 結(jié)論：明膠/自芨膠載藥多孔材料作為創(chuàng)面敷料和皮膚、肌腱組織工程支架材料具有安全可靠性。

9、 三、明膠/白芨膠載藥多孔材料對創(chuàng)面愈合的影響 目的：驗(yàn)證明膠/白芨膠載藥多孔材料的治療效果，探討其治療機(jī)理。 方法：我們進(jìn)行了明膠/白芨膠載藥多孔材料抗炎、鎮(zhèn)痛、抑菌、及其促進(jìn)傷口愈合作用的實(shí)驗(yàn)和對大鼠皮膚成纖維細(xì)胞VEGFmRNA、bFGFmRNA表達(dá)的影響實(shí)驗(yàn)等研究。 結(jié)果：明膠/白芨膠載藥多孔材料能夠明顯抑制小鼠耳廓腫脹的作用；能明顯減輕蛋清所致的足趾腫脹，能延長熱痛試驗(yàn)中小鼠舐后足的時(shí)間，能明顯減少醋

10、酸所致小鼠扭體的次數(shù)；對金黃色葡萄球菌(Staphylococcuaaureus)、大腸桿菌(Escherichiacoli)、綠膿桿菌(Bacteriumaeruginsa)均有一定的抑制作用；可以增加皮膚缺損創(chuàng)面組織中羥脯氨酸(OHP)含量，有明顯的促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用；可以使VEGF、bFGF等生長因子在創(chuàng)面組織中的表達(dá)增強(qiáng)；對體外培養(yǎng)的大鼠皮膚成纖維細(xì)胞VEGFmRNA、bFGFmRNA表達(dá)有明顯促進(jìn)作用。 結(jié)論：明膠/白