神經(jīng)激肽A對大鼠深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合的影響及其機制探討.pdf

1、背景：
　　皮膚組織作為人身體上的最大的器官，其對于神經(jīng)具有非常高的敏感性，皮膚組織的許多的生理功能如皮膚創(chuàng)面修復(fù)，身體體溫調(diào)節(jié)，免疫功能以及代謝功能，都和神經(jīng)支配有著很密切的關(guān)系。皮膚組織中的神經(jīng)作為人機體周圍神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，其來源于背根神經(jīng)節(jié)中的神經(jīng)元。皮膚組織中包括了表皮，真皮，皮膚附屬結(jié)構(gòu)，血管，神經(jīng)系統(tǒng)以及皮下脂肪層，它們都和神經(jīng)支配有著很密切的關(guān)系。皮膚組織可以表達分泌多種類型的神經(jīng)肽，它們既可以有來自其它皮膚細胞例

2、如血管內(nèi)皮細胞，成纖維細胞以及角質(zhì)形成細胞，也可以來自于感覺神經(jīng)元，其中，感覺神經(jīng)元是其最主要的分泌表達方式。通常所說，表皮內(nèi)的神經(jīng)包含了神經(jīng)激肽A，P物質(zhì)以及CGRP，而真皮內(nèi)的神經(jīng)則包含了神經(jīng)激肽A，P物質(zhì)，CGRP以及VIP。隨著對皮膚免疫相關(guān)疾病的研究，人們發(fā)現(xiàn)神經(jīng)和神經(jīng)肽也都參與了炎癥反應(yīng)—神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)（inflammation-cutaneous neurogenic inflammation）。
　　當(dāng)皮膚組織損

3、傷時，如果失去神經(jīng)支配，皮膚組織創(chuàng)面愈合將會出現(xiàn)明顯的延遲，表明周圍神經(jīng)釋放的感覺神經(jīng)肽與創(chuàng)面愈合有著密切的關(guān)系。皮膚組織創(chuàng)面中的神經(jīng)肽可以促進細胞組織釋放多種類型的細胞因子，從而引起神經(jīng)生長因子的分泌，從而可以促進創(chuàng)面皮膚神經(jīng)纖維的生長。皮膚創(chuàng)面修復(fù)愈合時，支配受損傷組織的周圍神經(jīng)可以通過分泌釋放包括神經(jīng)肽在內(nèi)的多種介質(zhì)參與創(chuàng)面愈合的調(diào)控過程，而神經(jīng)肽在神經(jīng)系統(tǒng)和受損傷組織間起著非常重要的信號介導(dǎo)作用。
　　神經(jīng)激肽A（Neur

4、okinin A，NKA），又名為K物質(zhì)（Substance K）或者神經(jīng)介質(zhì)L（Neuromedin L），作為一種神經(jīng)速激肽，其廣泛分布于機體的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中，在創(chuàng)面修復(fù)愈合的過程中發(fā)揮著非常重要的作用。神經(jīng)激肽 A和神經(jīng)肽 P物質(zhì)（SP）有著共同的前體——前速激肽原（pre-protachykinin，PPT），其由來自編碼P物質(zhì)的共同的TAC1基因編碼生成。相點羥脯氨酸含量均較B組明顯增加。
　　神經(jīng)激肽A和

5、P物質(zhì)在機體中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的分布區(qū)域內(nèi)高度重合，而在外周神經(jīng)系統(tǒng)中，兩者主要分布在對辣椒素比較敏感的感覺神經(jīng)內(nèi)。神經(jīng)激肽A不僅可以參與對創(chuàng)面外周神經(jīng)的修復(fù)，而且還對創(chuàng)面修復(fù)愈合中的多種炎性細胞（中性粒細胞，巨噬細胞以及淋巴細胞等）和多種細胞因子（IL-6，IL-1，TNF-α，TGF-α等）的調(diào)控產(chǎn)生作用，同時還對成纖維細胞，血管內(nèi)皮細胞的遷移，分化，增殖產(chǎn)生影響，從而對創(chuàng)面修復(fù)愈合產(chǎn)生作用。本研究將對神經(jīng)激肽 A對創(chuàng)面愈合的影響進行初

6、步探討。
　　方法：
　　建立大鼠深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面模型。隨機分為A，B兩組，每組36只。A組大鼠創(chuàng)面局部注射神經(jīng)激肽A，B組大鼠創(chuàng)面局部用注射等量磷酸鹽緩沖液（PBS）作為對照，于傷后即刻和傷后1，3，7，10，14天不同時相點，測量并計算大鼠的創(chuàng)面愈合率，并作統(tǒng)計學(xué)分析；取不同時相點的創(chuàng)面組織切片作免疫熒光細胞化學(xué)染色和免疫酶細胞化學(xué)染色，結(jié)合計算機圖像分析，比較創(chuàng)面新生血管數(shù)，巨噬細胞數(shù)，中性粒細胞數(shù)，并作統(tǒng)計學(xué)分析；測定

7、創(chuàng)面皮膚組織羥脯氨酸（HYP）含量，并作統(tǒng)計學(xué)分析；對不同時相點的創(chuàng)面組織，作轉(zhuǎn)化生長因子-α（TGF-α），IL-1，IL-6和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）濃度測定，并作統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1.從傷后7d起，A組各時相點創(chuàng)面愈合率都要明顯高于B組。在傷后14d，A組創(chuàng)面已經(jīng)基本全部再上皮化，而B組大鼠創(chuàng)面的愈合率只達到85.12±3.14％。
　　2.從傷后7d起，A組創(chuàng)面新生血管化程度與B組相比，均有明

8、顯增加。
　　3.從傷后1d起，A組與B組大鼠的羥脯氨酸含量均有所下降，而隨著大鼠創(chuàng)面的逐漸修復(fù)愈合，創(chuàng)面的羥脯氨酸含量持續(xù)上升。A組在傷后7d起各時相點羥脯氨酸含量均較B組明顯增加。
　　4.從傷后3d起，A組和B組大鼠創(chuàng)面內(nèi)中性粒細胞含量均達到峰值，A組創(chuàng)面早期炎癥細胞（中性粒細胞）浸潤量較B組相比，有明顯增加。在創(chuàng)面愈合后期，B組創(chuàng)面內(nèi)中性粒細胞持續(xù)存在。
　　5.從傷后7d起，A組和B組創(chuàng)面內(nèi)巨噬細胞含量均達到

9、峰值，A組創(chuàng)面早期炎癥細胞（巨噬細胞）浸潤量較B組相比，有明顯增加。在創(chuàng)面愈合后期，B組創(chuàng)面內(nèi)巨噬細胞持續(xù)存在。
　　6. A組創(chuàng)面TGF-α，IL-1，IL-6和TNF-α濃度在一開始就比B組濃度高，在第3天時達到高峰，隨后下降，而B組創(chuàng)面相關(guān)因子濃度在第7天達到高峰，隨后下降。
　　結(jié)論：
　　1.應(yīng)用外源性神經(jīng)激肽A可促進加快大鼠創(chuàng)面新生血管的再生；增加大鼠創(chuàng)面膠原蛋白的含量，可以促進大鼠深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面的愈合。<