馬桑內酯對大鼠海馬神經元鈉電流的影響.pdf

1、目的：馬桑內酯(CoriariaLatcon，CL)是從植物馬桑中提取的一種快速、有效的致癇劑，其建立的癲癇模型可以表現出多種發(fā)作形式，并具有一定的耐藥性。但其作用機制尚未完全清楚。本實驗旨在研究CL對急性分離的SD大鼠海馬神經元鈉離子電流的影響，并探討其意義。 方法：用胰蛋白酶消化加吹打的方法急性分離SD大鼠(出生后7-14天)海馬神經細胞，并用銀染法對所分離的細胞進行驗證。在膜片鉗的全細胞模式下，對細胞膜上鈉離子通道的電生理

2、活動進行記錄。所得電流經過膜片鉗放大器(Axopatch200B)放大，濾波(1KHz)后，輸入計算機，用pCLAMP8.1軟件系統(AxonInstruments)進行數據采集與分析。同時研究20μl/ml和40μl/ml兩個濃度的CL對峰值鈉電流以及鈉通道電壓依賴性激活的影響。采用同一細胞加用CL前后自身比較以及不同濃度組之間比較的方法，對各組數據用SPSS11.0進行t檢驗或單因素方差分析，實驗結果以“均數±標準差”((-x)±s

3、)的形式表示，以P＜0.05為具有統計學差異。 結果：銀染法證實分離所得的海馬細胞是神經元。其細胞膜上可以記錄到內向的鈉電流和外向的鉀電流，離子通道的活性具有電壓依賴性。該鈉電流快速激活后快速失活，對河豚毒素(TTX)敏感。給以20μl/ml，40μl/ml的CL三分鐘后均可以不同程度地使峰值鈉電流的幅度增加(分別為17.32±8.52％，和37.98±4.91％)；與對照組(3.16±3.65％)相比，40μl/ml(P＜0.